[发明专利]糖基血红蛋白浓度测定方法和浓度测定装置

说明书

技术领域

本发明涉及测定在血液等的试样中含有的糖基血红蛋白的浓度的技术。

背景技术

在采用血液等的机体试样，对机体成分分离分析的情况下，广泛地使用采用了高速液相色谱法(HPLC)的高速液相色谱图装置(HPLC装置)(例如，参照专利文献1)。

如图13所示的那样，一般的HPLC装置9按照下述方式构成，该方式为：在试样调制单元90中，调制包括机体成分的试样，然后，将该试样导入分析柱91中，使机体成分吸附于分析柱91的填充剂中。在试样采用全血来测定糖基血红蛋白的情况下，对分析柱91，使从全血中采取的红血球溶血后，稀释溶血液，将该状态的机体试样导入。另一方面，吸附于填充剂中的机体成分通过将洗提液借助送液泵92，从洗提液瓶93供给分析柱91的方式洗提。包括来自分析柱91的机体成分的洗提液导入测光机构94，在该测光机构94中，连续地测定包括机体成分的洗提液的吸光度，由此，进行机体成分的分析。

如图14所示的那样，测光机构94在包括机体成分的洗提液在测光单元95的流路96中流通的期间，照射来自光源97的光，在此时的透射光在感光部98中感光。在感光部98中感光的光的波长在干涉滤波器99中选择，另一方面，从感光部98输出与感光量相对应的输出电平的信号。由于测光机构94中的洗提液的测光连续地进行，故洗提时间和感光量(吸光度)之间的关系作为图15所示的色谱图而获得。

在HPLC装置9中，还根据作为吸光度随时间的变化的色谱图，对血红蛋白总量进行运算，并且运算在该血红蛋白总量中糖基血红蛋白所占的比例(由图15中的交叉影线表示的部分)的糖基血红蛋白浓度。

但是，由于洗提液中的氧等的气体的溶解量随洗提液的温度而不同，故在装置外部的温度(环境温度)改变的情况下，或在于环境温度不同的状态进行机体成分的分析的情况下，洗提液中的溶解气体的状态(溶解量)不同。由此，在洗提液中的溶解氧浓度随环境温度的变化等而改变的情况下，血红蛋白中的氧合血红蛋白与脱氧血红蛋白的比例变化。另外，即使在导入分析柱91中的机体试样中，针对每次的测定，血红蛋白中的氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的比例改变。

另一方面，由于导入分析柱91中的机体试样采用稀释溶血液而氧较多的状态的式试样，在测光机构94中，将氧合血红蛋白的最大吸收波长415nm用作测定波长。由此，在环境温度的变化较大的环境下等的条件下，由于氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的比例不同，故在同一波长测定它们的情况下，难以进行正确的测定。

专利文献1：日本特开平7-120447号文献

发明内容

本发明的课题在于即使在氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的比例不同的情况下，仍可适当地测定糖基血红蛋白的浓度。

本发明的第1方面所提供的糖基血红蛋白浓度测定方法为利用在对试样照射光时从试样传过来的光来测定糖基血红蛋白浓度的方法，其中，利用在400～450nm的波长范围内具有峰值波长的多个测定波长的光来测定糖基血红蛋白的浓度。

优选的是，连续地或间歇地感光从试样传过来的光中的、至少在415～430nm的波长范围内的不同的峰值波长的光，从而测定糖基血红蛋白浓度。

本发明可适用于采用液相色谱法的糖基血红蛋白浓度的测定方法。在这种情况下，糖基血红蛋白浓度根据例如将测定波长、洗提时间和检测量作为变量的3维色谱图而运算。更具体地说，例如，糖基血红蛋白浓度作为如下比例运算得到，该比例为：在所述3维色谱图中，与糖基血红蛋白对应的体积或累计值在与血红蛋白总量对应的体积或累计值中所占的比例。糖基血红蛋白浓度也可以通过如下运算得出：根据各测定波长中的以洗提时间和检测量作为变量的色谱图，对糖基血红蛋白的比例进行运算，并且，对各测定波长的糖基血红蛋白的比例进行平均。

糖基血红蛋白浓度也可以作为如下比例运算得到，该比例为：在各测定波长的血红蛋白检测量的峰值和洗提时间的2维色谱图中，与糖基血红蛋白对应的面积在与血红蛋白总量对应的面积中所占的比例。