[发明专利]用于癌症治疗的粘液瘤病毒突变体

说明书

背景技术

WO 04/078206(Robarts Research Institute)公开了某些经遗传修饰的 粘液瘤病毒在癌症治疗中的应用。

发明内容

本发明涉及选自由M11L、M063、M136、M-T4和M-T7组成的组 中的粘液瘤病毒蛋白的活性缺陷的粘液瘤病毒(Myxoma virus，MV)。所述 病毒用于抑制癌细胞的方法和用于制造抑制癌细胞的药物，所述方法包 括对细胞施用有效量的粘液瘤病毒。所述病毒还用于治疗患有癌症的人 类对象的方法和制造用于治疗患有癌症的人类对象的药物，其包括对所 述患者施用有效量的粘液瘤病毒。本发明还提供了包含所述粘液瘤病毒 和药用载体的药物组合物，以及包含所述粘液瘤病毒与说明书的用于治 疗癌症患者的试剂盒。

附图说明

图1：在人类神经胶质瘤细胞中的内源活化Akt水平。

图2：在人类神经胶质瘤细胞系中不同vMyx-hrKO和对照病毒的病 毒复制效率。

图3：早期分泌和晚期分泌病毒基因表达表明一些vMyx-hrKO不能 从早期基因表达转入晚期基因表达。

图4：经过选择的单步生长曲线。

图5：基于细胞的细胞毒性测试。

具体实施方式

WO 04/078206(Robarts Research Institute)公开了某些经遗传修饰 的粘液瘤病毒在癌症治疗中的应用。此发明通过为此类应用提供更具特 异性的经修饰的粘液瘤病毒而代表着一种进步。其中所公开的技术普遍 适用于本发明的粘液瘤病毒，并且在此将WO 04/078206的内容通过参照 的方式引入本文。

本文所用的给定粘液瘤病毒蛋白的“活性缺陷”是指所述病毒的所 述活性小于野生型粘液瘤病毒的活性。给定病毒蛋白“基本无活性”是 指所述病毒不具有可检测水平的所述活性。基本不具有给定病毒蛋白的 活性的粘液瘤病毒的例子包括该蛋白的基因被删除或者敲除的突变体。

根据本发明，任何种类的癌症或癌细胞都可被抑制或治疗。在本发 明的一个具体实施方式中，所述癌细胞是哺乳动物癌细胞。在一个更具 体的实施例中，癌细胞是人类癌细胞。所述人类癌细胞的例子包括神经 胶质瘤。

已表明当把野生型粘液瘤病毒(vMyxgfp)瘤内注射到被植入至鼠脑 中的人神经胶质瘤时，该病毒能够实现具有增殖性的长寿命的感染，并 破坏和清除所植入的肿瘤组织(Lun等，2005，Cancer Research 65： 9982-9990)。还有，对NCI-60参考库(reference collection)的筛查表明， MV可有效地感染所测试的人肿瘤细胞中的大多数细胞(15/21)(Sypula 等.2004 Gene Ther.Mol.Biol.8：103-114)。为扩大对MV在癌症细胞中的 向性的了解，对此前测试过野生型MV允许性的一系列人神经胶质瘤细 胞(U87、U118、U251、U343、U73)进行了筛查。这些发现在随后的例子 中通过检测数种MV病毒的感染和复制而得以扩展，所述病毒中，被鉴 定为具有限定MV在兔细胞中的向性的作用的特异性宿主范围基因已被 删除。这些病毒被统称为宿主范围敲除病毒(vMyx-hrKO)。已经观察到 不同vMyx-hrKO在人神经胶质瘤细胞中的复制和传播能力有差异。 vMyxT2(U251)、vMyxT4KO(U87、U118、U251和U373)和vMyxT5KO (U251、U373)对特定人神经胶质瘤表现出了一些限制。相反，vMyx63KO 和vMyx135KO在若干种神经胶质瘤中显现出了更有效的复制和杀伤。

通过参考下列实施例将可以更好地理解本发明，这些实施例用于阐 述而不是用于限定本文所记载的发明。

实施例

实施例1

使用抗在苏氨酸308位置(P-Akt T308)和丝氨酸473位置(P-Akt S473)磷酸化的Akt的抗体或抗全Akt(total Akt)的抗体对50微克全细胞 裂解液进行探测。基于活化Akt的水平，预计U87和U343具备感染性， 而U118、U251和U373对MV感染的抵抗力更强(图1)。

实施例2