[发明专利]1，5-脱水葡萄糖醇的测定方法及1，5-脱水葡萄糖醇测定试剂组合物

说明书

技术领域

本发明涉及1，5-脱水葡萄糖醇的测定方法及1，5-脱水葡萄糖醇测定试剂组合物。

本申请要求2006年6月22日在日本提出的日本专利申请2006-172619号的优先权，将其内容援用于此。

背景技术

1，5-脱水葡萄糖醇(以下记为1，5-AG。)是葡萄糖的1位的还原物，微量存在于生物体内。人们发现该1，5-AG作为糖尿病的控制标记(control marker)有用(例如参见非专利文献1、2。)

如非专利文献1所述，1，5-AG是处于血糖值和糖化血红蛋白Alc(HbAlc)中间的标记，认为适合轻度糖尿病患者的自我管理。

[表1]

 

标记性质血糖值短时间内升降紊乱1，5-AG表示从检查时的约5～7天前开始的血糖状态HbAlc表示从检查时的约2个月前开始的平均血糖值

如非专利文献2所公开，健康人的1，5-AG值是血中仅次于葡萄糖的较多的单糖成分，根据在日本人中实施的临床试验，1，5-AG值的平均值为24.6±7.2(mean±SD)μg/ml。个人的生理变动幅度小，几乎不受日内及日间变动的影响。通常，与女性相比，男性有显示较高值的倾向。判定95％的健康人正常的cut off值约为14.0μg/ml。

目前，作为1，5-AG的测定方法，如非专利文献1所记载，已知有气相色谱法和酶法。酶法可以举出下述方法等：将0.2mL血浆(血清)检体进行除蛋白后，进一步通过微柱除去杂质。然后，使吡喃糖氧化酶(pyranose oxidase；以下记为PROD。)作用，通过1，5-AG的2位羟基的氧化反应产生过氧化氢，使用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase；HRP)使该过氧化氢显色，在420nm测定吸光度。人们正在开发基于该酶法的血液专用的测定盒。

非专利文献1：川合厚生、赤沼安夫、“1，5-脱水葡萄糖醇”、临床检查vol.33no.8 1989年8月901～907

非专利文献2：“Medical Technology”临时增刊号2002 Vol.30No.13(临时增刊号)糖尿病检查概述从筛查至并发症的检查pp.1498-1499(医齿药出版株式会社)

发明内容

但是，由于现有的利用酶法进行的1，5-AG测定中使用的PROD对葡萄糖的作用性高，所以有为了进行高精度的1，5-AG测定而必须清除大量存在于血中的葡萄糖(血糖)的问题。

通过使用对葡萄糖作用性低的1，5-AG氧化酶(脱氢酶)代替该PROD，使1，5-AG的测定更简便，同时能提高测定精度、缩短测定时间，所以迫切希望提供使用上述酶的1，5-AG的测定方法。

本发明是鉴于上述事实而得到的，目的在于提供一种1，5-AG测定方法及1，5-AG测定试剂组合物，所述测定方法在测定检体中的1，5-AG值时，干扰物质的影响小，与现有方法相比，能更高精度地测定1，5-AG值。

为了达到上述目的，本发明提供以下的方案。

[1]一种1，5-脱水葡萄糖醇的测定方法，其特征在于，使用下述蛋白质：

(a)由序列号2表示的氨基酸序列形成的蛋白质；

(b)由在序列号2表示的氨基酸序列中缺失、置换及/或添加1个或多个氨基酸得到的氨基酸序列形成、具有山梨糖脱氢酶活性的蛋白质；或