[发明专利]目标核酸的检测方法及该检测方法中所使用的容器

权利要求书

1.一种目标核酸的检测方法，所述目标核酸在检测对象的核酸上结合有种类不同的第一配体和第二配体，所述检测方法的特征在于，具有以下工序：

制备结合有多个与所述第一配体特异性结合的第一受体的第一微粒和结合有多个与所述第二配体特异性结合的第二受体的第二微粒的工序；

在底面具有沉降物捕获部的容器内混合可能含有所述目标核酸的试样、所述第一微粒和第二微粒的工序；和，

在所述混合工序后，观测由借助于第一配体与第一受体的结合和第二配体与第二受体的结合而分别连接的所述目标核酸与所述第一微粒和第二微粒构成的凝集物以及/或所述第一微粒和第二微粒的沉降物在所述容器底面的捕获分布的工序。

2.一种目标核酸的检测方法，所述目标核酸在检测对象的核酸上结合有种类不同的第一配体和第二配体，所述检测方法的特征在于，具有以下工序：

制备在底面上结合有多个与所述第一配体特异性结合的第一受体的容器的工序；

制备结合有多个与所述第二配体特异性结合的第二受体的磁性微粒的工序；

向所述容器内添加可能含有所述目标核酸的试样和所述磁性微粒的工序；和，

在该添加工序后，从所述容器外侧向所述磁性微粒施加磁力并观测该容器底面的磁性微粒的分布的工序。

3.一种目标核酸的检测方法，其特征在于，权利要求1所述的检测方法和权利要求2所述的检测方法均进行。

4.一种目标核酸的检测方法，其特征在于，在权利要求1～3任一项所述的目标核酸的检测方法中，将使用含有浓度已知的目标核酸的试样(1)时的观测结果、使用不含有该目标核酸的试样(2)时的观测结果和使用可能含有该目标核酸的试样(3)时的观测结果进行比较，确认所述试样(3)中目标核酸的有无或浓度。

5.一种目标核酸的检测方法，其特征在于，在权利要求1～3任一项所述的目标核酸的检测方法中，将使用含有已知的不同浓度的目标核酸的试样时的观测结果和使用可能含有该目标核酸的试样(4)时的观测结果进行比较，确认所述试样(4)中目标核酸的有无或浓度。

6.如权利要求1～5任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述配体选自亲水性有机化合物、地高辛配基、荧光素、Alexa、异硫氰酸荧光素(FITC)、2，4-二硝基苯酚(DNP)、四甲基罗丹明(TAMRA)、氨基酸残基数为6以上的多肽、2个以上单糖结合而成的糖链、生物素、蛋白质、聚组氨酸、HA、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、由序列号1表示氨基酸序列构成的肽(Flag)以及它们的衍生物。

7.如权利要求1～6任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述目标核酸为使用结合有第一配体的第一引物和结合有第二配体的第二引物并通过聚合酶链反应法而制备的。

8.如权利要求1～6任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述目标核酸为使用第一引物引入至少1个结合有第一配体的核苷酸，同时使用第二引物引入至少1个结合有第二配体的核苷酸并同时通过聚合酶链反应法而制备的。

9.如权利要求1～8任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述目标核酸为多个不同的种类，这些目标核酸中的第一和第二配体中的至少一方在每种目标核酸中都不同。

10.如权利要求1～9任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述目标核酸为生物体来源。

11.如权利要求1和3～10任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述第一和第二微粒的粒径为0.1～10μm，且光学上能够相互区分。

12.如权利要求1～11任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，多个所述容器设置在同一板上，且各容器的容量为0.1～0.5ml。

13.如权利要求1和3～12任一项所述的目标核酸的检测方法，其特征在于，所述容器的沉降物捕获部在形成研钵状的底面上以同心圆状配置有径向截面为锯齿状的多个凹凸，从中心向外侧由峰连接到谷的第一倾斜面的长度(h)为0.2～20μm、从中心向外侧由谷连接到峰的第二倾斜面的长度(l)为0.5～50μm、连接峰和中心的直线与水平面所成的角度(θ₁)为15～45°。