[发明专利]肽酰精氨酸脱亚胺酶及其在生产瓜氨酸化的蛋白和肽中的用途

权利要求书

1.蛋白、肽或蛋白水解产物，其中作为蛋白或肽的一部分的瓜氨酸和 精氨酸残基的摩尔比为至少0.15，优选至少0.30，更优选至少0.5，还更 优选至少1.0，进一步还更优选至少2.0以及最优选至少4。

2.经修饰的权利要求1的蛋白、肽或蛋白水解产物，其是植物蛋白、 脱脂奶蛋白、奶蛋白、乳清蛋白、酪蛋白、明胶蛋白、卵蛋白、微生物蛋 白或其水解产物。

3.权利要求1或2的蛋白水解产物，其中平均肽长度为3至9个氨基 酸。

4.前述权利要求中任意一项所述的蛋白水解产物，其具有5至50之间 的DH。

5.权利要求1-4中任意一项所述的蛋白、肽或蛋白水解产物在食物、 饲料或营养药物，例如膳食补充剂或药品中的用途以及在制备食物、饲料 或营养药物，例如膳食补充剂或药品中的用途。

6.酶促产生蛋白、肽或蛋白水解产物的方法，其中，所述蛋白、肽或 蛋白水解产物中原本存在的精氨酸残基的至少15％，优选至少30％，更优 选至少45％，还更优选至少60％，最优选至少80％转化为瓜氨酸残基，所 述方法中，所述蛋白、肽或蛋白水解产物与蛋白精氨酸脱亚胺酶一起孵 育。

7.食品，其包含权利要求1-4中任意一项所述或可通过权利要求6的 方法获得的蛋白、肽或蛋白水解产物。

8.权利要求7的食品，其是婴儿配方食品或临床食品。

9.经分离的多肽，其具有蛋白精氨酸脱亚胺酶活性，其选自由下述 (a)和(b)构成的组：

(a)具有下述氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列与SEQ ID NO： 6、8、9、10、13或14的氨基酸1至640具有至少30％的氨基酸序列同一 性；

(b)被下述多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸能在低严谨条件下 与下述(i)或(ii)杂交：(i)SEQ ID NO：3的核酸序列或其在超过60 个(优选超过100个)核苷酸上至少80％或90％相同，更优选在超过200 个核苷酸上至少90％相同的片段，(ii)与SEQ ID NO：3的核酸序列互 补的核酸序。

10.权利要求9的多肽，其具有下述氨基酸序列，所述氨基酸序列与 SEQ ID NO：6的1-640的氨基酸序列的同一性为至少40％，优选至少 50％，优选至少60％，优选至少70％，更优选至少80％，进一步更优选至 少90％，最优选至少95％，进一步最优选至少97％。

11.权利要求9的多肽，其包含SEQ ID NO：6的氨基酸序列。

12.权利要求9的多肽，其由下述多核苷酸编码，所述多核苷酸能在低 严谨度条件，更优选在中等严谨度条件，最优选在高严谨度条件下，与 (i)SEQ ID NO：3的核酸序列或其片段，或(ii)与SEQ ID NO：3的核 酸序列互补的核酸序列杂交。

13.权利要求9的多肽，其从真菌获得，优选从Aspergillus，更优选从 Aspergillus niger获得。

14.经分离的多核苷酸，其包含下述核酸序列，所述核酸序列编码权 利要求9的多肽，或能在低严谨度条件，更优选在中等严谨度条件，最优 选在高严谨度条件下，与SEQ ID NO：3杂交。

15.多核苷酸，其编码具有蛋白精氨酸脱亚胺酶活性的多肽，所述多 核苷酸包含

(c)编码氨基酸SEQ ID NO：11的多核苷酸序列，以及

(d)多核苷酸序列，其编码前蛋白信号序列，其中被编码的前蛋白 信号序列位于被编码的前多肽的氨基末端，并且优选为15-30个氨基酸 长。

16.核酸构建体，其包含权利要求14或15所述的多核苷酸，所述多核 苷酸与指导在合适的表达宿主中生产多肽的一种或多种控制序列可操作地 相连。

17.重组表达载体，其包含权利要求16所述的核酸构建体。