[发明专利]收集和使用胎盘脐血干细胞的方法

权利要求书

1、一种收集脐血干细胞的方法，包括：

提供离体的非放血或部分放血的哺乳动物胎盘，该胎盘包含含有 脐血干细胞的脐血；

用压力介导的灌注溶液的液流灌注所述离体的非放血或部分放 血的哺乳动物胎盘以产生灌注液，该灌注液包含含有脐血干细胞的脐 血；

收集所述灌注液；和

从所述灌注液分离脐血干细胞以产生分离的脐血干细胞。

2、如权利要求1所述的方法，其中所述的离体哺乳动物胎盘是 非放血的。

3、一种收集脐血干细胞的方法，包括：

提供离体的非放血哺乳动物胎盘，该胎盘包含含有脐血干细胞的 脐血；

对所述的离体的非放血哺乳动物胎盘进行部分放血以获得部分 放血的胎盘和一定体积的含有脐血干细胞的脐血；

用压力介导的灌注溶液的液流灌注所述部分放血的哺乳动物胎 盘以产生灌注液，该灌注液包含含有脐血干细胞的脐血；

收集所述灌注液；和

从所述体积的脐血和从所述灌注液分离脐血干细胞以产生分离 的脐血干细胞。

4、如权利要求2所述的方法，进一步包括在分离前合并所述体 积的脐血和所述灌注液。

5、如权利要求1或3所述的方法，其中所述压力介导的灌注溶 液的液流包括灌注溶液的脉动流。

6、如权利要求4所述的方法，其中灌注是在足以产生基本上无 脐血干细胞的哺乳动物胎盘的条件下进行的。

7、如权利要求5所述的方法，其中灌注是使用蠕动泵进行的。

8、如权利要求1或3所述的方法，其中所述的分离的脐血干细 胞包括造血干细胞。

9、如权利要求1或3所述的方法，进一步包括在提供步骤后冷 却离体的哺乳动物胎盘以产生冷却的哺乳动物胎盘。

10、如权利要求8所述的方法，进一步包括：将所述冷却的离 体哺乳动物胎盘保持在从大约>0℃到大约15℃的温度下。

11、如权利要求10所述的方法，其中所述保持包括保持最多大 约40小时的时间。

12、如权利要求1所述的方法，其中所述的离体胎盘在取得后、 灌注前在冰上冷却或保存。

13、如权利要求10所述的方法，其中所述冷却的离体哺乳动物 胎盘保持在从大约>0℃到大约6℃范围的温度下。

14、如权利要求1或3所述的方法，其中所述方法在灌注之前不 需要向胎盘中施用或注射抗凝血剂。

15、如权利要求1或3所述的方法，其中所述胎盘在灌注之前不 施用或注射抗凝血剂。

16、如权利要求1或3所述的方法，其中所述灌注溶液包括包含 抗凝血剂的生理相容溶液。

17、如权利要求16所述的方法，其中所述灌注溶液包含选自肝 素、肌酸磷酸葡萄糖(CPDA)或其中两种或多种的任意组合的一种或 多种抗凝血剂。

18、如权利要求1所述的方法，其中所述的离体哺乳动物胎盘在 灌注之前是部分放血的。

19、如权利要求3所述的方法，其中部分放血包括通过静脉穿刺 或重力引流收集脐血。

20、如权利要求7所述的方法，其中灌注包括经由脐动脉和脐静 脉中的一条或多条进行灌注。

21、如权利要求20所述的方法，其中灌注进一步包括向一条或 多条脐动脉和脐静脉插管以获得插管的胎盘；和将插管的胎盘置于灌 注回路中。

22、如权利要求21所述的方法，其中灌注是以大约15次搏动/ 分钟至大约60次搏动/分钟的脉冲设置进行的。

23、如权利要求21所述的方法，其中灌注是以大约60次搏动/ 分钟的脉冲设置进行的。