[发明专利]降解除草剂的酶

权利要求书

1.一种基本上纯化的多肽，其裂解草甘膦产生甘氨酸。

2.一种基本上纯化的多肽，其裂解草甘膦的膦酰甲基C-3碳-氮键。

3.权利要求1或2的多肽，其包含单氨基酸链。

4.权利要求1-3任一项的多肽，其中所述多肽是可溶的。

5.权利要求1-4任一项的多肽，其中草甘膦的裂解基本上不产生乙醛酸。

6.权利要求1-5任一项的多肽，其中草甘膦的裂解基本上不产生肌氨酸。

7.一种基本上纯化的多肽，其具有比GOX(SEQ ID NO：3)高的裂解草甘 膦的效率。

8.一种基本上纯化的多肽，其具有大于550μmol/min/mg的裂解草甘膦 的比活性。

9.一种基本上纯化的多肽，其包含选自下组的序列：

i)SEQ ID NO：1所示氨基酸序列，

ii)与i)至少25％相同的氨基酸序列，

其中所述多肽裂解含胺除草剂。

10.权利要求9的多肽，其中所述含胺除草剂是草甘膦或草胺膦。

11.权利要求9或10的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：1至少 60％相同的氨基酸序列。

12.权利要求9或10的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：1至少 90％相同的氨基酸序列。

13.权利要求1-12任一项的多肽，其中所述多肽可以纯化自节杆菌菌种。

14.权利要求13的多肽，其中所述节杆菌菌种是节杆菌TBD (Arthrobacter sp.TBD)。

15.权利要求1-14任一项的多肽，其与至少一种其它多肽融合。

16.一种分离的多核苷酸，其包含具有选自下组的序列的核苷酸：

i)SEQ ID NO：2，

ii)编码权利要求1-15任一项的多肽的核苷酸序列，

iii)与i)至少25％相同的核苷酸序列，

iv)在低严格条件下与i)杂交的核苷酸序列，

v)与i)-iv)互补的核苷酸序列。

17.权利要求16的多核苷酸，其编码裂解含胺除草剂的多肽。

18.权利要求17的多核苷酸，其中所述含胺除草剂是草甘膦或草胺膦。

19.权利要求16-18任一项的多核苷酸，其包含在严格条件下与i)杂交 的序列。

20.一种重组多核苷酸，包含在植物细胞中起作用的启动子，所述启动 子与编码权利要求1-15任一项的多肽的结构DNA序列可操纵地连接，所 述结构DNA序列与在所述细胞中起作用的3’聚腺苷酸化序列可操纵地连 接，其中所述启动子与所述结构DNA序列是异源的且能表达所述结构DNA 序列，以增强细胞对于含胺除草剂的抗性。

21.包含权利要求16-20任一项的多核苷酸的载体。

22.权利要求21的载体，其中所述多核苷酸与启动子可操纵地连接。

23.包含至少一种权利要求16-20任一项的多核苷酸和/或至少一种权利 要求21或22的载体的宿主细胞。

24.权利要求23的宿主细胞，其是植物细胞。

25.一种重组细胞，其裂解草甘膦并产生甘氨酸。

26.一种包含导入的多肽的重组细胞，所述多肽裂解草甘膦的膦酰甲基 C-3碳-氮键。

27.一种制备权利要求1-15任一项的多肽的方法，所述方法包括在使得 编码所述多肽的多核苷酸表达的条件下培养编码所述多肽的权利要求23的 宿主细胞或者编码所述多肽的权利要求22的载体，并回收表达的多肽。