[发明专利]靶定脂肪体的蛋白质

权利要求书

1.将目的蛋白质靶定至细菌细胞的胞内疏水内含体的方法，所述方法 包括在携带所述疏水内含体的细菌细胞中表达编码融合蛋白的核苷酸序 列，所述融合蛋白包含与所述目的蛋白质有效连接的疏水目标肽。

2.权利要求1的方法，其中所述内含体是TAG-、WE-或PHA-型。

3.前述权利要求中任一项的方法，其中目标肽为原核肽或真核肽。

4.前述权利要求中任一项的方法，其中所述目标分子选自细菌、动物 或植物来源的肽。

5.前述权利要求中任一项的方法，其中所述目标分子是

a)来自在其天然状态中与原核PHA内含体结合的蛋白质；或

b)来自在其天然状态中与真核TAG或WE内含体结合的蛋白质。

6.权利要求5的方法，其中所述目标分子选自聚羟基链烷酸酯体结合 泽漆皂甙、围脂滴蛋白、脂肪分化相关蛋白质(ADRP)/adipophilin和尾 部相互作用蛋白质(TIP)。

7.权利要求6的方法，其中所述目标分子选自：

a)PhaP1(SEQ ID NO：19)

b)围脂滴蛋白A(SEQ ID NO：27)

c)ADRP(SEQ ID NO：35)

d)TIP47(SEQ ID NO：31)

或其功能等同物。

8.前述权利要求中任一项的方法，其中所述目的蛋白质是酶。

9.权利8的方法，其中所述酶是参与目的疏水(亲脂)化合物生物合 成的酶。

10.权利9的方法，其中所述酶是参与以下物质的生物合成：

a)亲脂维生素、其衍生物和前体，

b)脂肪酸和脂肪族醇

c)调味物质。

11.前述权利要求中任一项的方法，其中所述细菌细胞选自天然的或 重组的细菌，所述细菌具有产生TAG-、WE-和PHA-型内含体的能力， 例如所述细菌尤其是产生TAG的诺卡氏菌形放线菌；及产生TAG的链霉 菌；n；产生WE的不动杆菌属细菌和Alcanivorax细菌；及埃希氏菌属细 菌、棒杆菌属细菌和杆菌属细菌的重组菌株。

12.权利要求11的方法，其中所述细菌细胞选自混浊红球菌PD630 (DSM 44193)和耻垢分枝杆菌mc²155(ATCC 700084)。

13.前述权利要求中任一项的方法，其中所述细菌细胞被包含所述融 合蛋白的编码序列的表达构建体转化，所述编码序列在所述细菌宿主细胞 中处于有效的启动子序列调控之下。

14.微生物制备目的亲脂化合物的方法，所述方法包括培养重组细菌 宿主和在支持制备所述亲脂化合物的条件下培养所述宿主，所述重组细菌 宿主包含具有至少一种参与所述亲脂化合物生物合成的酶的胞内内含体， 所述亲脂化合物靶定至所述内含体。

15.权利要求14的方法，其中分离携带所述目的亲脂化合物的所述内 含体并从所述内含体中回收所述目的亲脂化合物。

16.权利15的方法，其中所述亲脂化合物选自

a)亲脂维生素、其衍生物和前体，

b)脂肪酸和脂肪族醇

c)调味物质。

17.用于将目的蛋白质靶定至细菌细胞的胞内疏水内含体的融合蛋 白，所述融合蛋白包含与所述目的蛋白质有效连接的目标肽。

18.权利要求17的融合蛋白，其将所述目的蛋白质靶定至TAG-、WE- 和PHA-型内含体。

19.权利要求17和18中任一项的融合蛋白，其中目标肽是原核肽或 真核肽。

20.权利要求17至19中任一项的融合蛋白，其中所述目标分子选自 细菌、动物或植物来源的肽。