[发明专利]应用DKK2刺激血管生成的方法以及含有DKK2的组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用DKK2蛋白来刺激血管生成的方法以及 含有DKK2蛋白的组合物。

背景技术

血管生成是新的毛细血管形成的过程。该过程在正常的生物学 条件下很少发生，而总是伴随胚胎发生、黄体形成以及创伤愈合而 发生。特别地，血管生成在肿瘤转移中发挥重要作用(Folkman J 和Klagsburn M，Science，235(4787)，pp.442-447，1987)。

血管生成过程包括四个步骤，即，第一步是通过血管生成因子 的刺激导致蛋白酶作用而使毛细血管基膜分离，第二步是血内皮细 胞迁移和增殖，第三步是由于血内皮细胞的分化而形成毛细血管以 及第四步是新毛细血管的重建。

已经报道了血管生成过程受各种刺激因子和抑制因子的调控， 例如生长因子、细胞因子、脂类代谢物质、止血蛋白(haemostatic protein)的隐原性片断等(Folkman J.Nat.Med.，1(1)，pp.27-31， 1995)。血管生成刺激因子可以分成若干类，例如，主要是细胞生 长诱导因子、具有免疫活性的细胞因子、激素和脂类产物等 (Bussolino F等，Trends.Biochem.Sci.，22(7)，pp.251-256，1997)。

然而，由于刺激因子不仅作用于血管内皮细胞上而且还作用于 其他的相邻细胞上，因此其在应用于临床使用时具有各种问题 (Malecki M等，Gene Ther.，Supple 1，pp.S159-169，2005)。

因此，最近的研究集中在找到只作用于血内皮细胞的重要基 因、尤其是在血管生成中涉及的基因，以及利用该基因治疗需要血 管生成的各种疾病的新方法。但是，至今仍未得到令人满意的结果。

治疗性血管生成是通过给予血管生成因子，如血管内皮生长因 子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、发育调节内皮基因座-1 (developmentally regulated endothelial locus-1，Del-1)、肝细胞生长 因子(HGF)、血小板源性内皮细胞生长因子(PD-EGF)、血管生 成素、转化生长因子(TGF)和表皮生长因子(EGF)等或编码它 们的基因以促进侧支血管形成从而治疗缺血性疾病的方法，该方法 作为用于治疗不能实施经皮冠状动脉腔内血管成形术(PTCA)和 冠状动脉旁路移植术(CABG)方法的严重缺血性疾病的一种新方 法尤其突出(Kim D.K.和Kwon H.C.，Thejournal of endocrinology， 16(3)，pp.328-3382001)。

DDK2是Wnt蛋白的抑制蛋白，据报道其作为Wnt信号通路的 抑制因子或刺激因子起作用(Wu W等，Curr.Biol.，10(24)，pp. 1611-1614，2000)。它具有两个特异性的富含半胱氨酸的结构域，并 分成各种长度的连接区域。特别地，属于Dickkopf家族的该蛋白在 家族成员之间具有高度保守的半胱氨酸-2区域(cystein-2)以及10 个半胱氨酸(Krupnik VE等，Gene，238(2)，pp.301-313，1999)。据报 道，DKK2与破骨细胞的分化密切相关(Li X等，Nat.Genet.，37(9)， pp.945-952，2005)。

然而，在上述引用的任何文献中都没有报道或披露关于DKK2 对血管生成的刺激活性的作用，这些披露内容结合于此作为参考。

发明内容

技术问题

因此，本发明的发明人进行了深入研究以找到内皮细胞中的多 个分化控制基因以及用于刺激血管生成的新的有效方法，最后，他 们发现DKK2对于血管生成表现出潜在的刺激作用，因此该蛋白可 用于治疗和预防缺血性疾病。

技术方案

根据本发明，本发明提供了一种用于刺激哺乳动物血管生成的 方法，该方法包括向哺乳动物的未形成血管的组织给予有效量的 DKK2蛋白或编码DKK2蛋白的DNA的步骤。