[发明专利]利用有丝分裂灭活的干细胞修复损伤组织的方法

说明书

根据35 USC 119(e)，本申请要求2006年7月20日提交的美国临时申请号 60/807,861的优先权，该申请的内容纳入本文作参考。

本发明涉及利用有丝分裂灭活和/或致死灭活的干细胞来修复受损伤的器 官和/或组织。可利用任何类型的离体灭活干细胞，因为这种干细胞在体内应用 前或后不可能发生不需要的有丝分裂或细胞分裂。可采用有丝分裂灭活和/或致 死灭活的干细胞来改善不同类型器官和/或组织的神经疾病，损伤和/或退变状 况。

发明背景

目前正在研究利用干细胞，特别是ESC的多能性来修复或重生新生组织。 然而，由于ESC具有多能性当将其注射入体内时可能形成畸胎瘤，这是一种 失调的癌性肿瘤生长。畸胎瘤包含所有三种胚层：中胚层、内胚层和外胚层的 细胞。

为防止产生畸胎瘤，目前移植时使用的ESC必须先离体分化成约定的成 熟干细胞系表型和/或完全分化的细胞。此过程耗时，需要长时间保持在规范的 优良操作(GMP)条件下，和需要纯化最终产品确保其不污染有残留多能干细胞 的方法，以及需要确保含有所需身份的细胞，各批细胞之间等价均一的方法。 必须离体培养ESC衍生细胞，维持在无饲养细胞和成分明确的培养基中以符 合GMP指南要求。

近年来细胞培养技术的进展在维持和扩增非分化ESC上已符合GMP要 求。然而为了避免形成畸胎瘤，必须使ESC经历费时费力的广泛分化成为成 熟体细胞后才能体内应用。此外，必须对这些体细胞进行纯化或选择以避免污 染残留的畸胎瘤形成ESC细胞或其它未分化或分化的细胞。

由于围绕使用人ESC的政府限制和伦理道德问题束缚了ESC技术的进一 步发展。许多要关注的问题是人ESC的医疗应用。

虽然围绕ESC存在着伦理问题而接受用目前方法产生的ESC移植病人需 要终身免疫抑制治疗来防止ESC衍生细胞被排斥。可采用免疫抑制剂来实现 这种免疫抑制。免疫抑制剂是一类能抑制机体免疫系统的药物。此类药物包括 的许多制剂也有细胞毒性可用于治疗癌症。用作免疫抑制剂的细胞毒药物包括 抗代谢药(硫唑嘌呤)、烷化剂(环磷酰胺)、叶酸拮抗剂(甲氨喋呤或6-MP)。其 它免疫抑制剂包括霉酚酸酯(CellCept)和环孢菌素。可将这些药物用于移植ESC 的病人以降低机体对外源物(如移植的ESC细胞)的自身天然防卫反应以图防止 机体对ESC的排斥。

抑制病人的免疫系统可能导致许多不良副反应，如反胃、恶心、呕吐、腹 痛、口腔溃疡、黑尿、白粪、黄疸(皮肤或眼白部分发黄)、罕见的出血或碰伤。 严重的(和威胁生命的)副作用是骨髓活性降低，此种副作用可通过定期血液化 验监测。偶而，服用免疫抑制剂的病人在开始这些药物治疗后几个月可能发生 胰腺炎(胰腺炎症)。

此外，采用免疫抑制剂治疗的病人可能发生各种感染，如细菌感染、疱疹 病毒感染(如唇疱疹和带状疱疹)、巨细胞病毒、真菌感染和卡氏肺囊虫 (Pneumocystis carini)感染(肺感染)的危险性增大。由于病人处在这种感染增加 的危险中，他们可能需要常规评估来核查感染的症候和症状。为预防疾病，病 人需要服用抗病毒药物如阿昔洛韦、赛美维、伐昔洛韦；抗真菌药物如氟康唑 和伏立康唑(voriconzaole)，以及抗菌素如复方新诺明(Bactrim)；。

接受免疫抑制剂治疗的病人可能经历每日常规的实质性变化。病人必须提 高警惕避免接触造成感染风险的个人和活动。

可能需要限制病人在任何给定日期接触来访的个体数目和避开拥挤的密闭 区域。病人必须避免接触已患病的朋友和家人包括学龄儿童。如果病人的直接 家人中有人患病，该病人需要呆在另一房间中或旅馆内直到该家人不再患病。 病人还必须避免接触婴儿和最近至少8周内曾接种过口服脊灰活病毒疫苗的儿 童。该疫苗接种者可能在其机体排泄物如唾液和粪便中排出病毒而感染免疫抑 制的个体。病人需要避开拥挤地方如饭店、教堂或寺院、零售店和公共运输场 所。

还必须限制病人进行或从事某些具有感染高风险的活动，这些活动包括给 婴儿换尿布、与宠物交谈沟通和参加大排挡。

发明概述