[发明专利]用于鉴定味觉调节剂的模式味觉细胞和方法无效
申请号: | 200780028218.6 | 申请日: | 2007-07-27 |
公开(公告)号: | CN101495508A | 公开(公告)日: | 2009-07-29 |
发明(设计)人: | 哈里什·拉达克瑞施那;迈克尔·D·布朗 | 申请(专利权)人: | 可口可乐公司 |
主分类号: | C07K14/705 | 分类号: | C07K14/705;G01N33/566;G01N33/53 |
代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 | 代理人: | 王德桢 |
地址: | 美国佐*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 味觉 调节剂 模式 细胞 方法 | ||
1.来源于人HuTu-80肠内分泌细胞的模式味觉细胞或其衍生细胞,其天然或重组表达用于味觉信号转导的一种或多种信号转导蛋白并显示味觉细胞功能。
2.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述信号转导蛋白是味觉受体,所述味觉受体包括甜味剂受体、其异源或同源低聚物、或其组合。
3.如权利要求2所述的模式味觉细胞,其特征在于所述甜味剂受体是异源低聚的T1R2/T1R3甜味剂受体。
4.如权利要求2所述的模式味觉细胞,其特征在于所述甜味剂受体是同源低聚的T1R3/T1R3或T1R2/T1R2甜味剂受体。
5.如权利要求2所述的模式味觉细胞,其特征在于所述甜味剂受体是T1R3甜味剂受体。
6.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述信号转导蛋白包括选自由味觉受体蛋白、G蛋白、调节因子G蛋白信号转导(RGS)蛋白或效应物组成的组中的全部蛋白,其中所述蛋白是味觉信号转导必需的。
7.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述味觉信号转导是甜味信号转导。
8.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述味觉信号转导是苦味信号转导。
9.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述味觉信号转导是鲜味信号转导。
10.如权利要求1所述的模式味觉细胞,其特征在于所述人HuTu-80肠内分泌细胞包括来源于所述HuTu-80细胞的亚克隆或修饰的细胞。
11.利用如权利要求1所述的模式味觉细胞筛选调节味觉信号转导的化合物的方法,所述方法包括:
a)从如权利要求1所述的模式味觉细胞分离和纯化用于味觉信号转导的一种或多种目标蛋白;
b)利用各种基于细胞的分析,测定试验化合物对纯化的目标蛋白或它们与味觉信号转导途径中其他蛋白的相互作用的影响;
c)根据所述基于细胞的分析,鉴定调节纯化的目标蛋白或它们与味觉信号转导中其他蛋白的相互作用的试验化合物;和
d)确认所述化合物在所述模式味觉细胞中调节味觉信号转导。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于所述蛋白选自由用于味觉的味觉受体、G蛋白、RGS蛋白、效应物和任意细胞部件组成的组。
13.如权利要求11所述的方法,其特征在于所述蛋白是甜味剂受体,所述甜味剂受体包括T1R受体家族、其同源或异源低聚物。
14.如权利要求11所述的方法,其特征在于所述蛋白是包括Gα蛋白的G蛋白,所述Gα蛋白选自由Gαi蛋白、α-味蛋白、Gαi2蛋白及其他组成的组。
15.如权利要求11所述的方法,其特征在于所述蛋白是RGS蛋白,所述RGS蛋白包括GAIP、RGSz1、RGS1、RGS2、RGS3、RGS4、RGS5、RGS6、RGS7、RGS8、RGS9、RGS10、RGS11、RGS12、RGS13、RGS14、RGS16、RGS17、RGS21、D-AKAP1、p115RhoGEF、PDZ-RhoGEF、bRET-RGS、Axin或mCONDUCTIN蛋白。
16.如权利要求12所述的方法,其特征在于所述效应物选自由磷脂酶C(PLC)、cAMP、cGMP、IP3、钙(Ca2+)和其他第二信使组成的组。
17.如权利要求11所述的方法,其特征在于所述影响通过对所述模式味觉细胞中选自以下组的基于细胞分析的观察来测定,所述组由测量钙(Ca2+)释放的分析,cAMP、cGMP、PIP2/IP3或其他第二信使的分析,测量GI肽分泌的分析和测量神经递质分泌的分析组成。
18.如权利要求11所述的方法,其特征在于在所述模式味觉细胞中利用感官味觉试验进一步确认所述试验化合物。
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