[发明专利]通过毛细管电泳法分析试样的方法有效
申请号: | 200780029543.4 | 申请日: | 2007-08-29 |
公开(公告)号: | CN101501485A | 公开(公告)日: | 2009-08-05 |
发明(设计)人: | 田中喜秀;胁田慎一;中山雄介;米原聪 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人产业技术综合研究所;爱科来株式会社 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 毛细管 电泳 分析 试样 方法 | ||
技术领域
本发明涉及通过毛细管电泳法分析试样的方法,用于该方法的毛细管和毛细管电泳装置。
背景技术
在毛细管电泳法中,集中在毛细管内壁的离子通过施加的电压移动而产生电渗流,由此试样移动而进行电泳。作为毛细管,使用熔融二氧化硅制的毛细管,有时会存在由于试样吸附而无法获得良好的电渗流。因此,提出了覆盖毛细管内壁的技术(专利文献1、2、3、4)。另一方面,血液中的血红蛋白(Hb)与血液中的葡萄糖反应,形成糖化Hb。血液中的糖化Hb由于反映了生物体血糖值的以往历程,因此作为糖尿病诊断和治疗等中的指标,其中,β链N末端的缬氨酸糖化的物质被称为血红蛋白Alc(HbAlc),作为特别重要的指标,在临床检查等中其对进行测定。血液中的血红蛋白的测定方法有例如琼脂糖电泳法、毛细管电泳法、HPLC法、免疫法、酶法等。这些当中,能检测出血红蛋白遗传变异等微小变异的是毛细管电泳法和HPLC法。另一方面,对于血红蛋白的分析装置,要求小型化。对于这一点,HPLC法难以实现装置整体的小型化。相反,在毛细管电泳法中,通过微芯片化,能使装置整体小型化。
然而,在上述现有的毛细管电泳法中,存在难以高精度分析血红蛋白的问题,为了解决该问题,提出了用蛋白质覆盖毛细管内壁,再在其上覆盖多糖类的技术(专利文献5)。然而,在该技术中,必须在每次分析时进行用蛋白质覆盖毛细管内壁的操作,存在分析变复杂的问题。另一方面,提出了在两性离 子性类型的运行缓冲液中含有脂肪族二胺等流动抑制剂以进行毛细管电泳而不覆盖毛细管内壁的方法(专利文献6)。然而,在该方法中,存在虽然能分离变异血红蛋白,但无法分离出血红蛋白Alc的问题。这些问题并不限于血红蛋白,也是其它试样的毛细管电泳法普遍的问题。
专利文献1:日本特开2005-291926号公报
专利文献2:日本特开平4-320957号公报
专利文献3:日本特表平5-503989号公报
专利文献4:日本特表平8-504037号公报
专利文献5:日本特开平9-105739号公报
专利文献6:日本特开2006-145537号公报
发明内容
于是,本发明的目的是提供一种通过可实现装置的小型化、分析精度高、容易实施的毛细管电泳法分析试样的方法,用于该方法的毛细管和毛细管电泳装置。
为了实现上述目的,本发明的分析方法,其特征在于,其是通过毛细管电泳法分析试样的方法,包括:
准备上述毛细管电泳法中使用的毛细管的工序,和
在上述毛细管中,使试样与含有阴极性基团的化合物结合而成的复合物进行电泳的工序,
其中上述毛细管是在上述毛细管内壁层叠有由含有阴极性基团的化合物形成的阴极性层的毛细管,上述阴极性层通过共价键固定在上述毛细管内壁。
本发明的毛细管,其特征在于,其是在上述本发明的分析方法中使用的毛细管电泳用的毛细管,其中,在上述毛细管内壁,层叠有由含有阴极性基团的化合物形成的阴极性层,上述 阴极性层通过共价键固定在上述毛细管内壁。
本发明的毛细管电泳装置,其特征在于,其是在上述本发明的分析方法中使用的毛细管电泳装置,其中,包含上述本发明的毛细管。如后述那样,本发明的毛细管电泳装置可以为小型化(微芯片化)的微芯片电泳装置。
在本发明的分析方法中,由于使用在毛细管内壁形成有通过共价键固定的阴极性层的毛细管,因此可以防止血红蛋白等血液试样中的蛋白质等吸附在毛细管内壁,由此,可以产生良好的电渗流。此外,在本发明的分析方法中,由于试样与含有阴极性基团的化合物结合而生成复合物并使其进行电泳,因此,与试样单独进行电泳相比,分离效率提高。由此,根据本发明的分析方法,能短时间且高精度地分析血红蛋白等的试样。此外,上述阴极性层被牢固地固定在毛细管内壁,因此一旦形成,即使清洗,也不会容易地剥离,可重复使用。因此,在本发明的分析方法中,一旦形成阴极性层,无需在每次分析时形成阴极性层,可以容易地进行分析。此外,在本发明中,由于采用毛细管电泳法,因此可以将分析装置小型化。
附图说明
图1是表示本发明一个实施例中血红蛋白分析结果的图表。
图2是表示本发明其他实施例中血红蛋白分析结果的图表。
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