[发明专利]血球凝集素多肽和其相关试剂和方法

说明书

优先权的主张

本申请案根据35 USC 119(e)主张2006年8月14日申请的共同待决美国临时专利申 请案第60/837,868号以及2006年8月14日申请的共同待决美国临时专利申请案第 60/837,869号的优先权。这些现有申请案中每一者的完整内容是以引用的方式并入本文 中。

政府支持

本发明是由美国国立综合医学研究所(National Institute of General Medical Sciences)依据合同号U54 GM62116和美国国立卫生研究院(National Institutes of Health) 依据合同号GM57073所授予的美国政府支持下进行。美国政府对本发明享有某些权利。

背景技术

流感具有流行性、传染性、复发性和爆发性的长久历史。禽流感(包括H5N1菌株) 是高度感染性且潜在致命病原体，但其现在仅具有有限感染人类的能力。然而，已在历 史上观察发现禽流感病毒积聚改变其宿主特异性并使其易于感染人类的突变。实际上， 上个世纪的主要流感流行病中的两者是源自于已改变遗传组成、从而允许人类感染的禽 流感病毒。

对于当前H5N1、H7N7、H9N2和H2N2禽流感菌株可积聚改变其宿主特异性并使 其易于感染人类的突变存在显著关注。因此，需要评估HA蛋白在此等菌株中实际上是 否可以转化成可易于感染人类的形式，且进一步需要鉴别具有这种能力的HA变体。进 一步需要理解通常允许或禁止不同受检者(尤其人类)感染的HA蛋白的特征。同时需 要用于有效地治疗或延迟由流感病毒所引起的疾病发作的疫苗和治疗策略。

发明内容

本发明提供具有特定聚糖结合特征的血球凝集素多肽。详细来说，本发明提供结合 具有伞形拓扑的唾液酸化聚糖的血球凝集素多肽。在某些实施例中，本发明的HA多肽 结合具有高亲和力和/或特异性的伞形聚糖。在一些实施例中，与锥形拓扑聚糖相比较， 本发明的HA多肽对伞形聚糖展示结合优选性。

本发明同时提供与包括疫苗的所提供血球凝集素多肽相关的诊断和治疗试剂和方 法。

附图说明

图1：野生型HA的示范性序列的比对。由NCBI流感病毒序列数据库 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genomes/FLU/FLU.html)获得序列。

图2：HA聚糖结合域的序列比对。灰色：结合唾液酸所涉及的保守氨基酸。红色： 结合Neu5Acα2-3/6Gal基元所涉及的特定氨基酸。黄色：影响Q226(137、138)和E190 (186、228)定位的氨基酸。绿色：与连接到Neu5Acα2-3/6Gal基元的其它单糖(或修 饰)结合所涉及的氨基酸。ASI30、APR34、ADU63、ADS97和Viet04的序列是从其各 自的晶体结构获得。其它序列是从SwissProt(http://us.expasy.org)获得。缩写：ADA76， A/鸭/阿尔伯达(Alberta)/35/76(H1N1)；ASI30，A/猪/爱荷华(Iowa)/30(H1N1)；APR34， A/波多黎各(Puerto Rico)/8/34(H1N1)；ASC18，A/南卡罗来纳(South Carolina)/1/18 (H1N1)；AT91，A/得克萨斯(Texas)/36/91(H1N1)；ANY18，A/纽约(New York)/1/18 (H1N1)；ADU63，A/鸭/乌克兰(Ukraine)/1/63(H3N8)；AAI68，A/爱知(Aichi)/2/68 (H3N2)；AM99，A/莫斯科(Moscow)/10/99(H3N2)；ADS97，A/鸭/新加坡(Singapore) /3/97(H5N3)；Viet04，A/越南(Vietnam)/1203/2004(H5N1)。

图3：说明H1 HA的保守子序列特征的序列比对。

图4：说明H3 HA的保守子序列特征的序列比对。

图5：说明H5 HA的保守子序列特征的序列比对。

图6：用于理解聚糖受体特异性的框架。α2-3-和/或α2-6-连接聚糖可采用不同拓扑。