[发明专利]用于改良纤维素的酶法水解的酶组合物和方法

权利要求书

1.一种用于酶法水解纤维素以从预处理的木质纤维素原料产生含葡萄糖的水解产物的酶组合物，所述酶组合物包含纤维素酶、一种或多种β-葡萄糖苷酶以及用于将所述β-葡萄糖苷酶结合至所述预处理的木质纤维素原料上的粘合剂，其中所述水解通过以下步骤实现：

(i)用所述酶组合物部分地水解所述预处理的木质纤维素原料的水性浆液以产生含有葡萄糖、葡萄糖寡聚体或它们的组合的水解浆液，以及包含纤维素和木素的未水解纤维固体；

(ii)从所述水解的浆液分离出所述未水解的纤维固体以产生分离的纤维固体，其中所述纤维素酶和所述一种或多种β-葡萄糖苷酶与所述分离的纤维固体结合；

(iii)将所述分离的纤维固体再悬浮于一种水性溶液中以产生再悬浮浆液；以及

(iv)继续水解所述再悬浮浆液以产生含葡萄糖的水解产物。

2.根据权利要求1的酶组合物，其中所述粘合剂为一种可操作连接至所述一种或多种β-葡萄糖苷酶上的碳水化合物结合模块。

3.根据权利要求2的酶组合物，其中所述碳水化合物结合模块是一种纤维素结合域。

4.根据权利要求1的酶组合物，其中所述纤维素酶由曲霉属(Aspergillus)、腐质霉属(Humicola)、木霉属(Trichoderma)、芽孢杆菌属(Bacillus)、喜热裂孢菌属(Thermobifida)或它们的组合产生。

5.根据权利要求4的酶组合物，其中所述纤维素酶由木霉属产生。

6.根据权利要求1的酶组合物，其中所述一种或多种β-葡萄糖苷酶由曲霉属(Aspergillus)、腐质霉属(Humicola)、木霉属(Trichoderma)、芽孢杆菌属(Bacillus)、喜热裂孢菌属(Thermobifida)或它们的组合产生。

7.根据权利要求6的酶组合物，其中所述一种或多种β-葡萄糖苷酶由木霉属或曲霉属产生。

8.根据权利要求3的酶组合物，其中所述纤维素结合域是家族I纤维素结合域。

9.根据权利要求3的酶组合物，其中所述纤维素结合域是细菌或真菌纤维素结合域。

10.根据权利要求3的酶组合物，其中所述一种或多种β-葡萄糖苷酶包含一种将所述纤维素结合域可操作地连接于所述β-葡萄糖苷酶的接头。

11.根据权利要求1的酶组合物，其中所述一种或多种β-葡萄糖苷酶是天然存在的。

12.根据权利要求1的酶组合物，其中所述一种或多种β-葡萄糖苷酶是基因修饰的融合蛋白。

13.根据权利要求3的酶组合物，其中存在于所述酶组合物中的总β-葡萄糖苷酶的约75％至约100％(w/w)包含纤维素结合域。

14.根据权利要求13的酶组合物，其中存在于所述酶组合物中的总β-葡萄糖苷酶的约90％至约100％(w/w)包含纤维素结合域。

15.根据权利要求1的酶组合物，其中所述纤维素酶包括选自纤维素酶CBHI和CBHII及它们的组合的纤维二糖水解酶，以及选自纤维素酶EGI、EGII、EGIV、EGV和EGVI及它们的组合的内切葡聚糖酶。

16.根据权利要求1的酶组合物，其中在所述部分水解步骤(步骤(i))中，存在于所述酶组合物中的总纤维素酶的约75％至约100％(w/w)与存在于所述水性浆液中的纤维固体结合。