[发明专利]具有增加产率的支链淀粉酶变体

权利要求书

1.一种组合物，其包括分离的肽分子，所述分离的肽分子为SEQ ID  NO：6，并包括相对于SEQ ID NO：2在位置99和103处从谷氨酸至谷氨 酰胺的替代，其中所述分离的肽分子具有支链淀粉酶活性。

2.一种组合物，其包括分离的核酸分子，所述分离的核酸分子编码权 利要求1所定义的具有支链淀粉酶活性的肽分子。

3.权利要求2的组合物，其中所述分离的核酸分子由SEQ ID NO：5 的核苷酸序列组成。

4.一种组合物，其包括分离的DNA，所述分离的DNA编码SEQ ID  NO：6的氨基酸序列的蛋白质。

5.一种组合物，其包括由分离的DNA组成的表达构建物，所述分离 的DNA编码权利要求1所定义的具有支链淀粉酶活性的肽分子。

6.表达构建物，其包括可操作地连接至控制序列的编码权利要求1所 定义的具有支链淀粉酶活性的肽分子的核酸分子，所述控制序列可被由所 述表达构建物转化的宿主细胞识别。

7.根据权利要求6的表达构建物，其中所述核酸分子为SEQ ID NO：5 的核苷酸序列。

8.宿主生物，其转染了根据权利要求6或7所述的表达构建物。

9.根据权利要求8所述的宿主生物，其中所述宿主生物选自真菌、细 菌和真核细胞。

10.根据权利要求9所述的宿主生物，其中所述宿主生物选自枯草芽 孢杆菌、埃希氏大肠杆菌、里氏木霉、啤酒酵母、黑曲霉和地衣芽孢杆菌。

11.根据权利要求9所述的宿主生物，其中所述宿主生物选自芽孢杆 菌种。

12.组合物，其包括编码支链淀粉酶的表达构建物，所述表达构建物 包括SEQ ID NO：5的核酸序列。

13.组合物，其包括编码SEQ ID NO：6的肽的表达构建物。

14.产生支链淀粉酶的方法，其包括：

a.提供：i)表达构建物，其可操作地包括编码权利要求1所定义的具 有支链淀粉酶活性的肽分子的核苷酸序列；ii)宿主生物；和iii)培养工具；

b.将所述表达构建物转染至所述宿主生物，用以产生转染的宿主生 物；

c.在所述培养工具中培养所述转染的宿主生物，培养时间长度和条件 足以产生支链淀粉酶。

15.根据权利要求14的方法，其中所述核苷酸序列为SEQ ID NO：5 的序列。

16.根据权利要求14所述的方法，其中所述支链淀粉酶被从所述培养 工具中分离。

17.根据权利要求14所述的方法，其中所述宿主生物选自真菌、细菌 和真核细胞。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述宿主生物选自枯草芽孢杆 菌、埃希氏大肠杆菌、里氏木霉、啤酒酵母、黑曲霉和地衣芽孢杆菌。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述宿主生物选自芽孢杆菌 种。

20.产生支链淀粉酶的方法，其包括：

a.提供：i)用表达构建物转染的宿主生物，所述表达构建物可操作地 编码核苷酸序列，所述核苷酸序列编码SEQ ID NO：6的肽；和ii)培养工 具；

b.在所述培养工具中培养所述转染的宿主生物，培养时间长度和条件 足以产生支链淀粉酶。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述支链淀粉酶被从所述培养 工具中分离。

22.根据权利要求20所述的方法，其中所述宿主生物选自真菌、细菌 和真核细胞。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述宿主生物选自枯草芽孢杆 菌、埃希氏大肠杆菌、里氏木霉、啤酒酵母、黑曲霉和地衣芽孢杆菌。