[发明专利]生产3-羟基丙酸的β-丙氨酸/α-酮戊二酸氨基转移酶

权利要求书

1.分离蛋白，其中所述蛋白的氨基酸序列显示为SEQ ID NO：4、 6、10、12、14、17或19，并且其中所述蛋白具有β-丙氨酸氨基转移 酶(BAAT)活性。

2.权利要求1的分离蛋白，其中所述蛋白包含P3H取代、S24T 取代、D110N取代、F113L取代、A133T取代或其组合。

3.权利要求1的分离蛋白，其中所述蛋白具有SEQ ID NO：4、6、 10、12、14、17或19中显示的氨基酸序列的至少50个连续氨基酸， 并且其中所述蛋白具有BAAT活性。

4.分离核酸分子，其中所述核酸分子编码权利要求1的分离蛋白。

5.权利要求4的分离核酸分子，其与启动子序列可操作连接。

6.权利要求4的分离核酸分子，其中所述核酸序列显示为SEQ ID NO：3、5、7、9、11、13、16或18。

7.载体，其含有权利要求4的分离核酸分子。

8.重组核酸分子，其含有权利要求4的分离核酸分子。

9.分离细胞，其用权利要求8的重组核酸分子转化。

10.权利要求9的分离细胞，其中所述细胞是原核细胞。

11.权利要求9的分离细胞，其中分离的核酸序列显示为SEQ ID NO：5、7、9、11、13、16或18，以及其中所述细胞从β-丙氨酸生产 的丙二酰半醛比存在天然BAAT核酸序列时多至少50％。

12.权利要求11的分离细胞，其中所述细胞还含有编码3-HP脱 氢酶的外源或内源核酸分子，其中所述细胞产生3-羟基丙酸(3-HP)。

13.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码脂肪酶或 酯酶的外源核酸分子，并产生3-HP的酯。

14.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码酯酶的外 源核酸分子，并产生聚合的3-HP。

15.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码醇脱氢酶、 醛脱氢酶或二者的外源或内源核酸分子，并且其中所述细胞产生1，3- 丙二醇。

16.权利要求12的分离细胞，其中编码3-HP脱氢酶的核酸分子 编码SEQ ID NO：21、23、27或31所示的蛋白。

17.权利要求12的分离细胞，其中编码3-HP脱氢酶的核酸分子 显示为SEQ ID NO：20、22、26、29或30。

18.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码天冬氨酸 脱羧酶的外源核酸分子。

19.权利要求18的分离细胞，其中编码天冬氨酸脱羧酶的外源核 酸分子含有编码SEQ ID NO：39或41所示的蛋白的核酸序列。

20.权利要求18的分离细胞，其中编码天冬氨酸脱羧酶的外源核 酸分子显示为SEQ ID NO：38或40。

21.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码PEP羧化 酶的外源或内源核酸分子以及编码天冬氨酸氨基转移酶的外源或内源 核酸分子。

22.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞还含有编码丙酮酸羧 化酶的外源核酸分子。

23.权利要求21的分离细胞，其中编码PEP羧化酶的核酸分子包 含与PEP羧化酶可操作连接的合成启动子。

24.权利要求21的分离细胞，其中编码天冬氨酸氨基转移酶的核 酸分子包含与天冬氨酸氨基转移酶可操作连接的合成启动子。

25.权利要求12的分离细胞，其中所述细胞含有SEQ ID NO：52 所示的外源核酸分子。

26.分离细胞，其含有编码SEQ ID NO：6、12、17或19的外源核 酸分子。