[发明专利]D-1,2,4-丁三醇的微生物合成无效
| 申请号： | 200780032753.9 | 申请日： | 2007-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN101512004A | 公开（公告）日： | 2009-08-19 |
| 发明（设计）人： | J·W·佛罗斯特;W·牛 | 申请（专利权）人： | 密歇根州州立大学托管委员会 |
| 主分类号： | C12P7/18 | 分类号： | C12P7/18;C07C31/22;C12N9/04;C12N9/88;C07K16/40;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 | 代理人： | 陈文平;徐志明 |
| 地址： | 美国密*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 丁三醇 微生物 合成 | ||
1、一种制备D-1，2，4-丁三醇的方法，包括
(A)提供
(1)包含1，2，4-丁三醇生物合成酶系统的重组细胞体，所述酶系 统包含：(a)D-木糖脱氢酶、(b)D-木质酸脱水酶、(c)2-酮酸脱羧酶和 (d)醇脱氢酶，其中所述细胞体是经操作使(e)3-脱氧-D-甘油-戊酮糖 酸醛缩酶多肽或其核酸、(f)2-酮酸脱氢酶多肽或其核酸或者(g)同时(e) 和(f)受到抑制或灭活的细胞体；和
(2)在所述酶系统可运行以产生1，2，4-丁三醇的条件下能够向D- 木糖脱氢酶提供D-木糖的木糖源；及
(B)将所述细胞体和木糖源置于其中所述酶系统可以从D-木糖产 生1，2，4-丁三醇和其中木糖源向D-木糖脱氢酶提供D-木糖的条件下， 所述酶系统在所述条件下通过以下作用运行从而制备D-1，2，4-丁三 醇：
(1)所述D-木糖脱氢酶将D-木糖转化成D-木质酸，
(2)所述D-木质酸脱水酶将所得的D-木质酸转化成3-脱氧-D- 甘油-戊酮糖酸，
(3)所述2-酮酸脱羧酶将所得的3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸转化 成3，4-二羟基-D-丁醛，和
(4)所述醇脱氢酶将所得的3，4-二羟基-D-丁醛转化成D-1，2，4- 丁三醇。
2、一种制备D-1，2，4-丁三醇的方法，包括
(A)提供
(1)包含1，2，4-丁三醇生物合成酶系统的重组细胞体，所述酶系 统包含：(a)包含SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4或者具有D-木糖脱 氢酶活性的SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：4的保守置换变异体或同 源多肽中任一的氨基酸序列的D-木糖脱氢酶、(b)D-木质酸脱水酶、 (c)2-酮酸脱羧酶和(d)醇脱氢酶；和
(2)在所述酶系统可运行以产生1，2，4-丁三醇的条件下能够向D- 木糖脱氢酶提供D-木糖的木糖源；及
(B)将所述细胞体和木糖源置于其中所述酶系统可以从D-木糖产 生1，2，4-丁三醇和其中木糖源向D-木糖脱氢酶提供D-木糖的条件下， 所述酶系统在所述条件下通过以下作用运行从而制备D-1，2，4-丁三 醇：
(1)所述D-木糖脱氢酶将D-木糖转化成D-木质酸，
(2)所述D-木质酸脱水酶将所得的D-木质酸转化成3-脱氧-D- 甘油-戊酮糖酸，
(3)所述2-酮酸脱羧酶将所得的3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸转化 成3，4-二羟基-D-丁醛，和
(4)所述醇脱氢酶将所得的3，4-二羟基-D-丁醛转化成D-1，2，4- 丁三醇。
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