[发明专利]用于纯化高分子量透明质酸的有效方法无效
申请号: | 200780033000.X | 申请日: | 2007-07-06 |
公开(公告)号: | CN101512006A | 公开(公告)日: | 2009-08-19 |
发明(设计)人: | V·兰加斯瓦米;V·桑托什;J·达门德拉;V·纳塔拉;H·维兰卡;A·卡帕特 | 申请(专利权)人: | 利莱恩斯生命科学有限公司 |
主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26;C08B37/00 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 权陆军;付 磊 |
地址: | 印度马哈*** | 国省代码: | 印度;IN |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 纯化 分子量 透明 有效 方法 | ||
1.生产透明质酸(HA)或它的盐的方法,该方法包含:
(a)提供能生产HA的链球菌细菌;
(b)提供营养培养基来培养细菌,其中所述营养培养基包含二价锌 离子盐、1%酪蛋白水解物和5%选自乳糖和蔗糖的碳源;
(c)在营养培养基中培养细菌;和
(d)在需氧条件下发酵营养培养基,
其中所述透明质酸具有至少100万Da的分子量。
2.权利要求1的方法,其中所述发酵是连续的。
3.权利要求1的方法,其中所述盐是ZnSO4。
4.权利要求1的方法,其中在30-40℃的温度、300-500rpm的搅拌 速率、1-3vvm的通气和中性pH,进行所述发酵步骤至少15个小时。
5.权利要求1的方法,其中所述HA具有在约3.5x106Da至4.0x106Da范围内的分子量,且该方法生产产量为至少5g高分子量HA/升营养 培养基。
6.权利要求5的方法,其中发酵24小时后,HA的分子量是至少 3x106Da。
7.权利要求1的方法,其中所述细菌选自:兽瘟链球菌、马链球菌 和酿脓链球菌。
8.权利要求7的方法,其中所述细菌是兽瘟链球菌。
9.生产透明质酸(HA)或它的盐的方法,该方法包含:
(a)提供能生产HA的链球菌细菌;
(b)提供营养培养基来培养微生物源,其中所述营养培养基包含二 价锌离子盐、1%酪蛋白水解物和5%选自乳糖和蔗糖的碳源;
(c)在营养培养基中培养细菌;
(d)在需氧条件下发酵营养培养基,
(e)稀释和澄清营养培养基;
(f)用溶剂沉淀在稀释的培养基中存在的HA;
(g)将沉淀的HA或它的盐溶于溶液;
(h)将硅胶加入来自步骤(g)的HA溶液或HA盐溶液,然后去除硅 胶;
(i)用活性炭处理来自步骤(h)的HA溶液或HA盐溶液;和
(j)使用溶剂渗滤来自步骤(i)的HA溶液或HA盐溶液;
其中在没有任何去污剂或表面活性剂或福尔马林存在下和在中性 pH进行该方法;
其中所述HA具有至少100万Da的分子量。
10.生产透明质酸(HA)或它的盐的方法,该方法包含:
(a)提供能生产HA的链球菌细菌;
(b)提供营养培养基来培养细菌,其中所述营养培养基包含锌、浓 度为10g/L的酪蛋白水解物和浓度为50g/L的选自乳糖和蔗糖的碳源;
(c)在营养培养基中培养细菌;和
(d)在需氧条件下发酵营养培养基,
其中所述透明质酸具有至少100万Da的分子量。
11.通过权利要求1或6的方法生产的透明质酸或它的盐。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于利莱恩斯生命科学有限公司,未经利莱恩斯生命科学有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200780033000.X/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:可检测的核酸标签
- 下一篇:提高真菌细胞中基因表达的方法