[发明专利]黑素瘤抑制性活性蛋白（MIA）作为在黑素瘤治疗性反应中的早期指示物的应用

说明书

发明领域

本发明涉及黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)在罹患黑素瘤的哺乳动物受试者中作为响应黑素瘤肿瘤细胞抑制剂治疗的早期指示物的应用。

发明背景

黑素瘤在美国男性和女性中的总发病率在增加(参见例如，EdwardsB.K.等人，J.Nat.Cancer Inst.97：1407-1427(2005))。自从1981年，每年的增长率约为3％。根据美国癌症协会的估算，2005年美国约有59,580起黑素瘤的新病例，并且约7,700人死于此疾病(American Cancer SocietyCancer Facts and Figures 2005，Amer.Cancer Soc.2005：1-62)。FDA批准用于转移性黑素瘤的治疗包括达卡巴嗪、干扰素-α和白细胞介素-2。然而，在美国，具有弥散性疾病的患者的预后仍旧很差，5年存活率为16％或更低。由于当前治疗的有限效力，对于新型疗法的需要尤其急切。目前正在开发诸如抗血管发生剂、Raf激酶抑制剂和疫苗的新型治疗并且它们可向患有这一疾病的患者提供改善的存活(Mandara M.等人，Expert Rev.Anticancer Ther.6：121-130(2006))。

考虑到黑素瘤的高发病率及当前治疗的有限效力，需要黑素瘤生物标记及用于黑素瘤生物标记的检测法，该生物标记可用作在哺乳动物受试者中治疗性反应的精确的早期指示物来测量候选黑素瘤抑制剂的效率。

发明概述

根据前述，一方面，提供一种确定具有黑素瘤肿瘤细胞的哺乳动物受试者对黑素瘤抑制剂治疗的反应的方法。该方法包括：(a)确定在用黑素瘤抑制剂治疗开始前，取自哺乳动物受试者的第一生物样品中黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)的第一浓度；(b)确定在用黑素瘤抑制剂治疗开始后，自该哺乳动物受试者所取的第二生物样品中MIA的第二浓度；(c)比较MIA的第一和第二浓度，其中在第二生物样品中测量的MIA的第二浓度相比于在第一生物样品中测量的MIA的第一浓度的降低指示对黑素瘤抑制剂治疗的正反应。

另一方面，本发明提供一种评估黑素瘤抑制剂在治疗具有黑素瘤的哺乳动物受试者中的黑素瘤的效力的方法。该方法包括(a)确定用黑素瘤抑制剂治疗开始前，取自哺乳动物受试者的第一生物样品中黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)的第一浓度；(b)确定在用黑素瘤抑制剂治疗开始后，自该哺乳动物受试者所取的第二生物样品中MIA的第二浓度；和(c)比较MIA的第一和第二浓度，其中在第二生物样品中测量的MIA的第二浓度相比于在第一生物样品中测量的MIA的第一浓度的降低指示抑制剂对治疗黑素瘤有效力。

另一方面，本发明提供一种确定患者是否应该继续接受黑素瘤抑制剂治疗的方法。该方法包括(a)确定用黑素瘤抑制剂治疗开始前，取自哺乳动物受试者的第一生物样品中黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)的第一浓度；(b)确定在用黑素瘤抑制剂治疗开始后，自该哺乳动物受试者所取的第二生物样品中MIA的第二浓度；(c)比较MIA的所述第一和第二浓度；和(d)如果MIA的第二浓度相比于MIA的第一浓度降低至少20％，则确定应该继续用黑素瘤抑制剂治疗该患者。

又一方面，本发明提供一种鉴定对黑素瘤治疗具有效力的药剂的方法。该方法包括(a)确定向黑素瘤哺乳动物细胞系施用药剂前，取自培养的黑素瘤哺乳动物细胞系的第一样品中黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)的第一浓度；(b)确定向黑素瘤哺乳动物细胞系施用药剂后，取自该黑素瘤哺乳动物细胞系的第二样品中MIA的第二浓度；(c)比较MIA的第一和第二浓度；和(d)如果MIA的第二浓度相比于MIA的第一浓度降低至少20％，则确定该药剂对黑素瘤治疗具有效力。

附图简述

结合附图，通过参考下面的详细说明，本发明的前述方面和许多随附优点将更容易被理解。

图1A提供分离自多种哺乳动物和非哺乳动物物种的MIA蛋白的氨基酸序列比对；

图1B提供分离自灵长类动物的MIA蛋白的氨基酸序列比对；

图2图示说明MIA ELISA检测法的结果，其证明MIA由黑素瘤细胞系而非结肠癌细胞系分泌到培养基中，如实施例1所述；

图3图示说明MIA ELISA检测法在未处理的非荷肿瘤小鼠(n＝4)和植入了A375M人黑素瘤细胞、肿瘤体积接近250mm³的无胸腺裸鼠(n＝10)中检测的结果，如实施例2所述；

图4A图示说明A375M人黑素瘤异种移植小鼠模型中，MIA血浆浓度响应于由口服给药CHIR-265所诱导的肿瘤生长抑制而降低，如实施例2所述；