[发明专利]抗Lewisy和Lewisb抗原的抗癌抗体

说明书

技术领域

本发明涉及包含用于治疗癌症的抗体或抗原结合片段的结合复合 物。特别地，本发明提供包含与Lewis^y和Lewis^b抗原结合的抗体或抗 原结合片段的结合复合物，其中抗体或抗原结合片段是多聚体形式。 结合复合物诱导过表达Lewis^y和Lewis^b的肿瘤细胞细胞死亡。

背景技术

Lewis^y和Lewis^b是乳腺癌、肺癌、结肠癌和卵巢癌过表达的复杂 碳水化合物。因此，它们可能代表了单克隆抗体(mAb)治疗的好靶 点。Lewis^y半抗原是在2型血型低聚糖上发现的双岩藻糖化的四糖 (Fucα1-2Galβ1-4(Fucα1-3)GlcNAc)。该抗原是Lewis^b半抗原的位置异 构体(Fucα1-2Galβ1-3(Fucα1-4)GlNAc和Lewis^x半抗原的岩藻糖化衍 生物(Abe et al.(1986)Cancer Research 46：2639；Kim et al.(1986) Cancer Research 46：5985)。Lewis^y在乳腺、支气管、胰腺、生殖泌尿 系统和在胃肠道深部腺体表达。相反，Lewis^b在表面上皮表达(Sakamoto et al.(1989)Cancer Research 49：745-52；Kitamura et al.(1994)Proc. Natl.Acad.Sci 91：12957-61)。

IgM小鼠mAb C14用标准融合流程抗原发结肠直肠肿瘤细胞而产 生，并与Lewis^y和Lewis^b(延伸的和非延伸的)抗原结合(Brown et al. (1983)Biosci.Rep.3：163；Brown et al.(1984)Int.J.Cancer 33：727； Durrant et al.(1993)Hybridoma 12：647-60)。C14抗体与78％的结肠直 肠癌结合(Durrant et al.(1989)J.Natl.Cancer Inst.81：688-95)，然而其 作为鼠IgM不适合进行体内研究。为生产该抗体的IgG变种，用C14 mAb免疫大鼠，并纯化产生的大鼠抗C14抗体。以这种抗血清和 C14gp200抗原免疫大鼠，接着将其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，结 果产生5种IgG mAb，2种IgG3(SC101/23、SC101/29mAb)和3种IgG1 (SC101/33、SC101/42和SC101/43；这5种抗体以前已经以＂692＂mAb 公开)。所有IgG变种均识别Lewis^y和Lewis^b抗原并证实与C14特异 性相同。此外，薄层层析和ELISA显示这些抗体与延伸的和非延伸的 Lewis^y和Lewis^b半抗原结合，而不与Lewis^x半抗原或H血型半抗原结 合(Brown et al.(1983)Biosci.Rep.3：163)。

与Lewis^y和Lewis^b抗原结合的抗体是已知的，然而，SC101mAb 的独特性在于其能够识别Lewis^y和Lewis^b决定簇。没有别的mAb并且 仅有一种稀有的凝集素识别这两种分子的相似小平面。Lewis y/b主要 作为糖酯在神经酰胺骨架上表达。最近，结晶学的研究已表明Lewis^y特异性抗体能具有非常不同的结合位点，这些位点适应半抗原内N-乙 酰基-葡萄糖胺或岩藻糖残基(Ramsland et al.(2004)J.Mol.Biol.340： 809-18)。SC101由于其结合位点适应于由于彼此互为立体异构体而非 常罕见的Lewis^y和Lewis^b的方面而再次不同。令人进一步感兴趣的是 这些抗体在包括胃肠道的绝大多数正常组织中不能识别糖酯类，这可 能由于神经酰胺或其它非常相关的分子中的空间位阻效应。这使得 SC101抗体的组织分布很独特，但却与许多上皮肿瘤牢固结合(Brown et al.(1983)Biosci.Rep.3：163)。