[发明专利]改变抗体溶液中离子强度以减少乳光/聚集物

说明书

相关申请参考

本申请要求2006年10月12日提交的美国申请序号60/851,651的优先 权，将其内容完整引入本文作为参考。

技术领域

本发明涉及减少蛋白质制剂乳光的方法，以及具有减少的乳光的浓缩 蛋白质制剂的组合物，例如，药物组合物。

背景

在过去20年里，蛋白质，包括抗体已经被用于药物疗法。为了实现高 治疗剂量，通常以高浓度配制抗体(约10mg/ml到100mg/ml或更高) (Brekke，O.H.和Sandlie，I.(2003)Nat.Rev.Drug Discov.2：52-62)。某些 蛋白质施用方式通常需要高度浓缩的蛋白质制剂。例如，治疗性抗体的皮 下施用通常以大于约100mg/ml的浓度配制。这些浓缩的蛋白质制剂的一 些在高浓度时产生乳白色外观，其是一种通常被称作乳光的性质 (Schellekens，H.(2002)Nat.Rev.Drug Discov.1：457-462)。

浓缩的蛋白质溶液中乳光外观可以由多种因素引起，包括蛋白质浓 度、它在瑞利散射中的效应、温度、溶质-溶质相互作用的性质，等等。 当蛋白质容易发生乳光时，随着蛋白质浓度的升高，乳光外观通常更明显。 乳光溶液与聚集的蛋白质溶液的相似性已经在其丧失蛋白质活性和在药 物制剂中可能引起免疫原性方面引起了关注(Pinckard等人(1967)Clin Exp.Immunol.2：331-340；Robbins等人(1987)Diabetes 36：838-845； Cleland等人(1993)Crit.Rev.Therapeutic Drug Carrier Systems 10：307-377)。

从而，需要开发具有降低的乳光的高度浓缩的治疗性蛋白质，例如， 治疗性抗体的制剂。

概述

本发明至少部分基于如下发现：降低抗体制剂中的盐(如氯化钠)浓 度减少了制剂的乳光外观和/或制剂中高分子量种类的形成。从而，公开了 例如通过改变制剂的离子强度减少蛋白质(如抗体)制剂的乳光外观的方 法，以及具有降低的乳光的浓缩蛋白质的组合物，如药物组合物。也公开 了纯化方法，其在纯化方法中所选的步骤中监测和/或降低盐浓度。

因此，一方面，本发明描述了减少蛋白质制剂，如抗体制剂(例如， 包括蛋白质，如抗体的溶液)的乳光或者减少高分子量种类的量的方法。 该方法包括改变，例如减小或增加制剂的离子强度使得蛋白质制剂的乳光 外观和/或高分子量种类的量减少和/或消除。在实施方案中，蛋白质制剂 中离子强度与蛋白质浓度(例如，抗体浓度)的比例被修改或改变，例如， 减小或增加，使得蛋白质制剂的乳光外观和/或高分子量种类的量被减少和 /或消除。在实施方案中，在药物有效浓度下，例如，对于抗体制剂，在约 5、10、25、50、75、100、125、150mg/ml的浓度下，蛋白质制剂在减小 离子强度前显示出不想要的乳光和/或高分子量种类(例如，浊度大于约1、 2、3、4或5或更高的欧洲药典标准和/或高分子量种类的百分比对应于蛋 白质制剂的约2％、3％、5％、10％、15％、20％、30％或更高的质量百 分数)。