[发明专利]肺炎链球菌3型多糖的纯化有效
申请号: | 200780037800.9 | 申请日: | 2007-10-09 |
公开(公告)号: | CN101522906A | 公开(公告)日: | 2009-09-02 |
发明(设计)人: | 布赖恩·道格拉斯·巴勒尔;埃里克·赫勒·休斯;李初顺 | 申请(专利权)人: | 惠氏公司 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;A61K31/715;A61P31/04 |
代理公司: | 北京律盟知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 刘国伟 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺炎 链球菌 多糖 纯化 | ||
1.一种用于减少或去除含血清3型多糖的细胞肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)溶胞产物中的蛋白质杂质的方法,所述方法包含以下步骤:
a)将所述溶胞产物加热到50℃至80℃并保持15至60分钟以使蛋白质聚集和 沉淀;及
b)从所述溶胞产物中分离出沉淀物;
其中产生实质上纯的含血清3型多糖的溶胞产物。
2.如权利要求1所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热到60℃至70 ℃。
3.如权利要求2所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热30分钟至50 分钟。
4.如权利要求3所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热到65℃并保 持40分钟。
5.如权利要求1至4中任一权利要求所述的方法,其中步骤b)包含过滤所述溶 胞产物以自所述溶胞产物中去除沉淀物。
6.如权利要求5所述的方法,其中所述溶胞产物是使用至少一种选自由膜过滤 器和深度过滤器组成的群组的过滤器来过滤。
7.如权利要求6所述的方法,其中所述膜过滤器是0.45μm孔径膜过滤器。
8.如权利要求1至4中任一权利要求所述的方法,其中步骤b)包含使所述溶胞 产物离心以自所述溶胞产物中去除沉淀物。
9.一种用于减少或去除含血清3型多糖的细胞肺炎链球菌溶胞产物或分离物中 的蛋白质杂质的方法,所述方法包含以下步骤:
a)使所述溶胞产物或分离物的pH值增加到8.0至8.4;及
b)过滤所述溶胞产物或分离物;
其中产生实质上纯的含血清3型多糖的溶胞产物或分离物。
10.如权利要求9所述的方法,其中在过滤之前使所述溶胞产物或分离物的pH 值增加到8.2。
11.如权利要求9或10所述的方法,其中所述溶胞产物是使用至少一种选自由 膜过滤器和深度过滤器组成的群组的过滤器来过滤。
12.如权利要求11所述的方法,其中所述膜过滤器是0.45μm孔径膜过滤器。
13.一种用于减少或去除含血清3型多糖的细胞肺炎链球菌溶胞产物中的蛋白质 杂质的方法,所述方法包含以下步骤:
a)将所述溶胞产物加热到50℃至80℃并保持15至60分钟以使蛋白质聚集和 沉淀;
b)使所述溶胞产物离心并从所述溶胞产物中分离出沉淀的蛋白质以产生分离 物;
c)使所述分离物的pH值增加到8.0至8.4;及
d)过滤所述分离物;
其中产生实质上纯的含血清3型多糖的分离物。
14.如权利要求13所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热到60℃至 70℃。
15.如权利要求13所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热30分钟至 50分钟。
16.如权利要求13所述的方法,其中步骤a)包含将所述溶胞产物加热到60℃并 保持40分钟。
17.如权利要求13至16中任一权利要求所述的方法,其中步骤c)包含使所述分 离物的pH值增加到8.2。
18.如权利要求13至16中任一权利要求所述的方法,其中步骤d)包含使用至少 一种选自由膜过滤器和深度过滤器组成的群组的过滤器来过滤所述分离物。
19.如权利要求18所述的方法,其中所述膜过滤器是0.45μm孔径膜过滤器。
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