[发明专利]用于离心的袋状容器以及使用此袋状容器的基因导入方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于安装在离心分离机上对容纳于内部的分散液施加离心处理、在离心时不容易出现破袋或破损的用于离心的袋状容器，以及使用此袋状容器的基因导入方法。更具体地说，本发明涉及配置有与离心分离机的适配器的底面平行的袋状容器的容器壁面，以便施加垂直于容器壁面的离心力，在离心时不容易破袋或破损的用于离心的袋状容器以及使用此袋状容器的基因导入方法。 

背景技术

传统上，为了移送、混合、分离液态的医药品或溶解液，使用袋状容器。例如，容纳用于给患者打点滴的药液的袋状容器，所谓的“软袋”被作为用于点滴的容器而使用。另外，使用所谓的“双袋”的袋状容器，是在具有至少一个隔离壁的一个袋状容器中隔离并密封两种以上药液，在使用前破坏隔离壁，使这些药液混合，以给患者打点滴的袋状容器。进一步地，也使用血液袋，其由多个袋状容器组成，将采得的血液按照其成分分离并容纳于多个容器中，使该成分能够用于其它病症的患者。 

除此之外，在许多方面，此种袋状容器可以用于处理液态的医药品或溶解液。 

其原因如下，一般来说，袋状的容器随着内容液的量而变化其容积，因此，在充填、排出内容液的时候，有必要将容器内的空气排出、向容器内提供空气，以促进内容液的充填以及排出。然而，如上所述的容器的特征为，通过附连的端口，或者通过连结到此端口的管等， 可以充填、排出内容液。此特征以内容液不与外部气体接触的方式来实现上述操作，即，使得实施上述操作成为可能，在此操作中不受到来自外部气体的微生物对内容液的污染，使所谓的封闭系统化变得容易，因此，这种容器适合于作为处理无菌地采取和制造的液态的医药品的容器。 

基于这样的原因，对于要求无菌性的容器，很多情况下优选采用袋状容器，对于要求无菌性并且需要离心操作的容器，也采用袋状容器。上述血液袋就是其中的一例。 

即，充填有血液的袋状容器血液袋，其中，此血液是血浆作为分散媒，红血球、白血球、血小板等作为分散质而分散的分散液，此血液袋借助于离心机，被分别分离为红血球、白血球、血小板、血浆等成分，并被移送、充填至各自的袋状容器中，这些成分分别用于多个患者。 

由于血液袋的目的是分离回收分散液的各个成分，因此将装有分散液的血液的袋状容器在底面积小的纵长的离心杯中，使端口侧向上，底侧向下地设置，使其离心。 

在这样的情况下，由于离心力，位于形成于分散液表面的液面以下的容器壁紧靠离心适配器的内面，由此，其不向外侧膨胀，结果，沿着容器壁的壁面不产生张力，并且由离心所引起的破袋、破孔等不容易发生。 

然而，在要求无菌性并且需要离心操作的容器中，在离心的目的不仅是为了分离分散液的各成分的情况下，例如在将基因导入目标细胞的情况下，借助于离心通过使分散质的目标细胞或载体沉降，以便使其均一地分散在容器底面上，来提供使目标细胞与载体相互之间容易接触的环境，从而能够提高基因导入的效率(例如，特许文献1和2)。然而，如果底面积小，那么在离心或接触时，目标细胞之间会重叠，目标细胞与载体之间的接触效率变差，则基因导入效率下降，因此，有必要扩大底面积，使得目标细胞在底面上不重叠，以均一并 分散的状态存在。 

另外，通过在涂覆有亲和性对目标细胞及载体都较高的蛋白质的底面上执行此操作，可以提高目标细胞和载体的接触效率，进一步地，可以提高基因导入效率。在这种情况下，如果目标细胞重叠，则出现不能与涂覆有蛋白质的底面接触的细胞，则基因导入效率下降，还是有必要扩大底面积，使得目标细胞在底面上不重叠地分散。 

为了在袋状容器中满足这样的离心时的条件，需要将袋状容器平放在具有大的底面积的离心机的适配器上，即，配置与此适配器的底面平行的袋状容器的容器壁面，进行离心操作，以对容器壁面施加垂直的离心力。 

当然，在袋状容器的容器壁面上涂覆有亲和性对目标细胞和载体都较高的蛋白质的情况下，涂覆有蛋白质的袋状容器的容器壁面成为离心时的底面。 

在这样的离心时，施加到袋状容器内的内容液、即培养基上的离心力就转换为压力，一方面，产生使袋状容器的容器壁在垂直于底面方向上膨胀的力时，由于受到适配器底面的阻碍，因此不能使袋状容器的容器壁在与底面垂直的方向上膨胀，另一方面，产生使其与底面平行方向上膨胀的力，使袋状容器的两侧都受到压力负荷。通常，此部分对应于袋状容器的密封部，由于密封剥离或密封边缘的破损，因此容易成为破袋的原因。特别地，如将由不同材质形成的容器壁密封起来的情况，只能获得弱的密封强度的情况下，更容易破袋。