[发明专利]△17去饱和酶及其在制备多不饱和脂肪酸中的用途

权利要求书

1.分离的核酸分子，所述核酸分子选自：

a.)编码选自SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3的Δ17去饱和酶的分 离的核苷酸分子；或，

b.)与(a)完全互补的分离的核苷酸分子。

2.编码Δ17去饱和酶的分离的核酸分子，所述核酸分子选自SEQ  ID NO：1或SEQ ID NO：4。

3.多肽，所述多肽编码Δ17去饱和酶，所述去饱和酶由根据权利 要求1所述的分离的核酸分子编码。

4.多肽，所述多肽编码Δ17去饱和酶，所述去饱和酶选自SEQ ID  NO：2或SEQ ID NO：3。

5.分离的核酸分子，所述分离的核酸分子编码如SEQ ID NO：2中 示出的Δ17去饱和酶，其中至少175个密码子是经密码子最优化以用于 在耶氏酵母属中表达。

6.嵌合基因，所述嵌合基因包含可操作地连接至合适的调节序列 的根据权利要求1所述的分离的核酸分子。

7.转化的宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求1所述的分离 的核酸分子。

8.权利要求7的转化的宿主细胞，所述宿主细胞选自藻类、细菌、 酵母、卵菌和真菌。

9.权利要求8的转化的宿主细胞，其中所述酵母是含油酵母。

10.权利要求9的转化的宿主细胞，其中所述含油酵母选自：耶氏 酵母属、假丝酵母属、红酵母属、红冬孢酵母属、隐球酵母属、丝孢酵 母属和油脂酵母属。

11.一种用于产生二十碳五烯酸的方法，所述方法包括：

a.)提供宿主细胞，其包含：

(i)编码双功能Δ17/Δ15去饱和酶多肽的分离的核苷酸分子， 所述去饱和酶多肽选自SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3；和

(ii)花生四烯酸源；

b.)使步骤(a)的所述宿主细胞在使编码所述双功能Δ17/Δ15去饱 和酶多肽的所述核酸分子表达并使所述花生四烯酸转化成二 十碳五烯酸的条件下生长；以及

c.)任选回收步骤(b)的所述二十碳五烯酸。

12.一种用于产生二十碳四烯酸的方法，所述方法包括：

a.)提供宿主细胞，其包含：

(i)编码双功能Δ17/Δ15去饱和酶多肽的分离的核苷酸分子， 所述去饱和酶多肽示于SEQ ID NO：2；和

(ii)二高-γ-亚麻酸源；

b.)使步骤(a)的所述宿主细胞在使编码所述双功能Δ17/Δ15去饱 和酶多肽的所述核酸分子表达并使所述二高-γ-亚麻酸转化成二 十碳四烯酸的条件下生长；以及，

c.)任选回收步骤(b)的所述二十碳四烯酸。

13.一种用于产生多不饱和脂肪酸的方法，包括：

a)提供宿主细胞，其包含：

i)编码双功能Δ17/Δ15去饱和酶多肽的分离的核苷酸分 子，所述去饱和酶多肽示于SEQ ID NO：2；和

ii)脂肪酸源，所述脂肪酸选自亚油酸和二十碳二烯酸；

b)使步骤(a)的所述宿主细胞在使编码所述双功能Δ17/Δ15去 饱和酶多肽的所述核酸分子表达并使所述亚油酸转化成α-亚 麻酸和使所述二十碳二烯酸转化成二十碳三烯酸的条件下生 长；以及，

c)任选回收步骤(b)的α-亚麻酸和二十碳三烯酸。

14.根据权利要求11、12或13任一项的方法，其中所述分离的核 苷酸分子编码SEQ ID NO：2中示出的氨基酸序列所示的双功能Δ17/Δ15 去饱和酶多肽，其中至少175个密码子经密码子最优化以用于在耶氏酵 母属中表达。

15.根据权利要求11、12或13任一项的方法，其中：

a.)所述分离的核苷酸分子如选自SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4的 核酸序列所示；并且

b.)所述宿主细胞是解脂耶氏酵母。