[发明专利]用于产生报告分子的点击化学

权利要求书

1.产生包含至少两种不同官能团的报告分子的方法，其中至少一 个第一和至少一个第二手柄基团掺入到报告分子中，其中手柄基团选 自炔基、经保护的炔基、叠氮基、醛基、经保护的醛基、肼基或者羟 胺基，并且其中第一和第二手柄基团是不同的并且其中第一和第二手 柄基团选择性偶联到包含不同的第一和第二官能团的第一和第二反应 配偶体。

2.产生包含至少两种不同官能团的报告分子的方法，其包括

(a)从多个结构单元合成报告分子，其中至少一个结构单元包含 选自炔基、经保护的炔基、叠氮基、醛基、经保护的醛基、肼基或者 羟胺基的第一手柄基团，其中至少一个结构单元包含选自炔基、经保 护的炔基、叠氮基、醛基、经保护的醛基、肼基或者羟胺基的第二手 柄基团，并且其中第一手柄基团不同于第二手柄基团；

(b)在其中第一手柄基团是反应性并且第二手柄基团不是反应性 的条件下将第一种反应配偶体与第一手柄基团偶联，其中第一反应配 偶体包含第一官能团，并随后

(c)将第二反应配偶体与第二手柄基团偶联，其中第二反应配偶 体包含第二官能团并且其中第一官能团不同于第二官能团。

3.权利要求1或2的方法，其中所述报告分子选自肽、核酸和核 酸类似物。

4.权利要求1-3任一项的方法，其中所述报告分子包含多至 2000，优选4-200，更优选10-100个结构单元。

5.权利要求1-4任一项的方法，其中所述官能团选自标记基团， 如染料、淬灭基团和附着基团，如生物素、生物素衍生物和半抗原。

6.权利要求1-5任一项的方法，其中第一和第二官能团是标记 基团和淬灭基团或者其中第一和第二官能团是标记基团和附着基团。

7.权利要求1-6任一项的方法，其中手柄基团选自炔基和经保 护的炔基。

8.权利要求7的方法，其中包含叠氮基的反应配偶体通过点击反 应偶联到炔基。

9.权利要求1-8任一项的方法，其中第一和第二手柄基团是炔 基和经保护的炔基或者其中第一和第二手柄基团是第一经保护的炔基 和第二经保护的炔基。

10.权利要求1-9任一项的方法，其中在第一手柄基团为未保护 并且第二手柄基团为经保护的条件下，第一种反应配偶体偶联到第一 手柄基团。

11.权利要求1-10任一项的方法，其中至少三种手柄基团掺入 到报告分子中。

12.权利要求1-11任一项的方法，其中第一手柄基团是炔基并 且第二和第三手柄基团是携带不同保护基的经保护的炔基。

13.权利要求1-12任一项的方法，其中报告分子的合成是化学 合成，优选化学固相合成，其中在结合固相的情况下通过结构单元的 逐步装配合成报告分子。

14.权利要求13的方法，其中至少第一反应配偶体是偶联的而报 告分子结合至固相。

15.权利要求13的方法，其中在报告分子从固相切除后，第一反 应配偶体被偶联。

16.权利要求1-12任一项的方法，其中合成是报告分子合成， 其中报告分子从核苷三磷酸结构单元合成。

17.检测样品中分析物的方法，其包括步骤：

(a)提供样品；

(b)将样品与报告分子接触，该报告分子包含至少两种不同的官 能团，其中所述官能团通过包含1，2，3-三唑环的接头基团结合至报告 分子，

(c)检测报告分子与分析物的相互作用，其表明样品中分析物的 存在和/或量。

18.权利要求17的方法，其中分析物是核酸或者核酸切割或结合 蛋白。

19.权利要求17或18任一项的方法，其中报告分子与分析物的 相互作用是结合，优选杂交。