[发明专利]通过低pH和二价阳离子分离生物大分子的方法

权利要求书

1.在包含杂质的组合物中分离抗体或可溶性蛋白的方法，其中所述杂 质包括不溶性蛋白、脂质、核酸或其任何组合，该方法包括：

(a)降低所述组合物的pH；

(b)向所述组合物添加二价阳离子；以及

(c)把所述抗体或可溶性蛋白与所述杂质分离，

其中通过离心所述组合物进行(c)的分离，该离心形成上清液和沉淀 物，其中所述抗体或可溶性蛋白基本在所述上清液中，或其中通过 过滤所述组合物进行(c)的分离，该过滤形成渗透流和滞留流，其中 所述抗体或可溶性蛋白基本在所述渗透流中。

2.如权利要求1所述的方法，其中形成渗透流和滞留流的所述过滤通 过切向流过滤进行。

3.如权利要求1所述的方法，其中(a)中所述组合物的pH降低至少1pH 单位。

4.如权利要求1所述的方法，其中(a)中所述组合物的pH降低至选自 如下的pH范围内：

i)3.0至6.5;

ii)3.0至5.0；和

iii)4.0至pH4.7。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含真核细胞物质。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述二价阳离子选自Ca²⁺、Mg²⁺、 Cu²⁺、Co²⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Be²⁺、Sr²⁺、Ba²⁺、Ra²⁺、Zn²⁺、Cd²⁺、Ag²⁺、 Pd²⁺、Rh²⁺及其组合。

7.如权利要求1所述的方法，其中向所述组合物添加所述二价阳离子 形成选自如下的二价阳离子浓度：

i)0.1mM至500mM；

ii)1mM至100mM；和

iii)2mM至50mM。

8.如权利要求1-7任意一项所述的方法，其中添加所述二价阳离子将 所述抗体或可溶性蛋白的回收率提高选自如下的量：

i)3%以上；和

ii)10%以上。

9.如权利要求1-7任意一项所述的方法，其中通过过滤所述组合物进 行(c)中的分离，其中该过滤导致跨膜压；且其中所述跨膜压在该过 滤过程中基本保持恒定。

10.如权利要求1所述的方法，其中：

(a)所述组合物的pH被降低至pH3.0至pH5.0；

(b)该二价阳离子选自Ca²⁺、Mg²⁺、Cu²⁺、Co²⁺、Mn²⁺及其组合；以及

(c)通过过滤所述组合物进行该分离。