[发明专利]合理设计的细胞培养基

权利要求书

1、一种在细胞培养物中产生多肽的方法，所述方法包含：

(1)提供细胞培养物，其包含：

a.细胞，所述细胞包含编码相关多肽的核酸；及

b.期望细胞培养基，其包含用于细胞群细胞群的计算浓度的氨基酸、用于 细胞维持的计算浓度的氨基酸、及纳入相关多肽中的计算浓度的氨基酸；和

(2)将所述细胞培养物维持在可使所述相关多肽表达的条件下。

2、一种在细胞培养物中产生多肽的方法，所述方法包含：

(1)提供细胞培养物，其包含：

a.细胞，所述细胞包含编码相关多肽的核酸；及

b.期望细胞培养基，其包含用于细胞群细胞群的计算浓度的氨基酸及纳入 相关多肽中的计算浓度的氨基酸；两种所述浓度均乘以基线因数；和

(2)将所述细胞培养物维持在可使所述相关多肽表达的条件下。

3、一种在细胞培养物中产生多肽的方法，所述方法包含：

(1)提供细胞培养物，其包含：

a.细胞，所述细胞包含编码相关多肽的核酸；及

b.期望细胞培养基，其具有依据等式A＝[(M*X)+(N*P)+(Y*M*X)]*F计算的 基线调整氨基酸浓度A，其中X是每单位细胞群细胞群所用氨基酸浓度，P 是针对每单位多肽效价用于纳入相关多肽中的氨基酸浓度，M是所述细胞培 养物的期望峰值细胞密度的乘数，N是相关多肽的期望浓度的乘数，Y是细 胞维持因数；且F是基线因数；和

(2)将所述细胞培养物维持在可使所述相关多肽表达的条件下。

4、如权利要求3所述的方法，其进一步包含自加载物流体回收经纯化多肽的方 法，所述回收方法包含如下步骤：

使所述加载物流体在作业条件下经过存于柱中的基质，所述作业条件可使所述基 质结合至少2.8mg多肽/mL基质，其中所述基质选自由下述组成的群组：带电离子交 换型基质、疏水作用色谱树脂、及固定化金属亲和色谱树脂；和

从所述柱的流出物回收所述经纯化多肽。

5、如权利要求3所述的方法，其进一步包含自加载物流体回收经纯化多肽的方 法，所述回收方法包含如下步骤：

使所述加载物流体在由至少为0.1的分配系数界定的作业条件下经过存于柱中的 基质；和

从所述柱的流出物回收所述经纯化多肽。

6、一种在细胞培养物中产生多肽的方法，所述方法包含：

(1)提供细胞培养物，其包含

a.细胞，所述细胞包含编码相关多肽的核酸；及

b.起始细胞培养基，其中所述起始细胞培养基的体积占期望细胞培养基体 积的约60-99％；

(2)对步骤(1)的所述细胞培养物提供补加细胞培养基，其中所述补加细胞培养基 的体积占所述期望细胞培养基体积的约1-40％，且其中所得期望细胞培养基包含 用于细胞群细胞群的计算浓度的氨基酸、用于细胞维持的计算浓度的氨基酸、及 纳入相关多肽中的计算浓度的氨基酸；和

(3)将所述细胞培养物维持在可使所述相关多肽表达的条件下。

7、一种在细胞培养物中产生多肽的方法，所述方法包含：

(1)提供细胞培养物，其包含

a.细胞，所述细胞包含编码相关多肽的核酸；及

b.起始细胞培养基，其中所述起始细胞培养基的体积占期望细胞培养基体 积的约60-99％；

(2)对步骤(1)的所述细胞培养物提供补加细胞培养基，其中所述补加细胞培养基 的体积占所述期望细胞培养基体积的约1-40％，且其中所得期望细胞培养基具有 依据等式A＝[(M*X)+(N*P)+(Y*M*X)]*F计算的基线调整氨基酸浓度A，其中X 是每单位细胞群细胞群所用氨基酸浓度，P是针对每单位多肽效价用于纳入相关 多肽中的氨基酸浓度，M是所述细胞培养物的期望峰值细胞密度的乘数，N是所 述相关多肽的期望浓度的乘数，Y是细胞维持因数；且F是基线因数；和

(3)将所述细胞培养物维持在可使所述相关多肽表达的条件下。