[发明专利]NELL肽表达系统无效

专利信息
申请号: 200780042671.2 申请日: 2007-11-08
公开(公告)号: CN101583716A 公开(公告)日: 2009-11-18
发明(设计)人: 淦·丁;苏立奇·科罗达;本·吴 申请(专利权)人: 加利福尼亚大学校务委员会
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/12;C12N15/16;C12N15/63;C12N1/19;C12N1/21;G01N33/48;G01N33/50;C07K1/14;C07K1/16;C07K1/18;C07K1/22
代理公司: 上海天翔知识产权代理有限公司 代理人: 刘粉宝
地址: 美国*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: nell 表达 系统
【权利要求书】:

1.在哺乳动物细胞中表达肽的方法,所述方法包括:

提供一核酸构成物,该核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸;

用所述核酸构成物转染哺乳动物细胞;和

在适合表达所述NELL肽的条件下培养所述哺乳动物细胞。

2.如权利要求1所述的方法,其中所述哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢细胞。

3.如权利要求2所述的方法,其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

4.如权利要求2所述的方法,其中所述核酸编码NELL1或NELL2,

其中NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,

其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。

5.如权利要求2所述的方法,进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽;和基本上纯化所述NELL肽。

6.如权利要求3所述的方法,进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽;和基本上纯化所述NELL肽。

7.如权利要求5所述的方法,进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。

8.如权利要求6所述的方法,进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。

9.如权利要求1所述的方法,其中所述纯化包括层析纯化。

10.如权利要求2所述的方法,其中所述纯化包括层析纯化。

11.一用于在哺乳动物细胞中表达一NELL肽的核酸构成物,所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。

12.如权利要求11所述的核酸,其中所述昆虫分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

13.如权利要求11所述的核酸,其中所述核酸编码NELL1或NELL2,

其中所述NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,

其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。

14.如权利要求11所述的核酸构成物,其中所述哺乳动物细胞是CHO细胞。

15.一用于表达一NELL肽的哺乳动物细胞系,所述细胞系包括一核酸构成物,所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。

16.如权利要求15所述的细胞,其中所述哺乳动物细胞系包括CHO细胞。

17.如权利要求16所述的细胞,其中所述CHO细胞分泌NELL1或NELL2肽。

18.如权利要求16所述的细胞,其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

19.如权利要求16所述的细胞,其中所述核酸编码NELL或NELL2肽,

其中所述NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6和

其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。

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