[发明专利]NELL肽表达系统无效
申请号: | 200780042671.2 | 申请日: | 2007-11-08 |
公开(公告)号: | CN101583716A | 公开(公告)日: | 2009-11-18 |
发明(设计)人: | 淦·丁;苏立奇·科罗达;本·吴 | 申请(专利权)人: | 加利福尼亚大学校务委员会 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/12;C12N15/16;C12N15/63;C12N1/19;C12N1/21;G01N33/48;G01N33/50;C07K1/14;C07K1/16;C07K1/18;C07K1/22 |
代理公司: | 上海天翔知识产权代理有限公司 | 代理人: | 刘粉宝 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | nell 表达 系统 | ||
1.在哺乳动物细胞中表达肽的方法,所述方法包括:
提供一核酸构成物,该核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸;
用所述核酸构成物转染哺乳动物细胞;和
在适合表达所述NELL肽的条件下培养所述哺乳动物细胞。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢细胞。
3.如权利要求2所述的方法,其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。
4.如权利要求2所述的方法,其中所述核酸编码NELL1或NELL2,
其中NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,
其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。
5.如权利要求2所述的方法,进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽;和基本上纯化所述NELL肽。
6.如权利要求3所述的方法,进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽;和基本上纯化所述NELL肽。
7.如权利要求5所述的方法,进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。
8.如权利要求6所述的方法,进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。
9.如权利要求1所述的方法,其中所述纯化包括层析纯化。
10.如权利要求2所述的方法,其中所述纯化包括层析纯化。
11.一用于在哺乳动物细胞中表达一NELL肽的核酸构成物,所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。
12.如权利要求11所述的核酸,其中所述昆虫分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。
13.如权利要求11所述的核酸,其中所述核酸编码NELL1或NELL2,
其中所述NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6,
其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。
14.如权利要求11所述的核酸构成物,其中所述哺乳动物细胞是CHO细胞。
15.一用于表达一NELL肽的哺乳动物细胞系,所述细胞系包括一核酸构成物,所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。
16.如权利要求15所述的细胞,其中所述哺乳动物细胞系包括CHO细胞。
17.如权利要求16所述的细胞,其中所述CHO细胞分泌NELL1或NELL2肽。
18.如权利要求16所述的细胞,其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。
19.如权利要求16所述的细胞,其中所述核酸编码NELL或NELL2肽,
其中所述NELL1选自下列组包括:SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6和
其中NELL2选自下列组包括:SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。
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