[发明专利]NELL肽表达系统

权利要求书

1.在哺乳动物细胞中表达肽的方法，所述方法包括：

提供一核酸构成物，该核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸；

用所述核酸构成物转染哺乳动物细胞；和

在适合表达所述NELL肽的条件下培养所述哺乳动物细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢细胞。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述核酸编码NELL1或NELL2，

其中NELL1选自下列组包括：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，

其中NELL2选自下列组包括：SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14。

5.如权利要求2所述的方法，进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽；和基本上纯化所述NELL肽。

6.如权利要求3所述的方法，进一步包括收集从所述细胞系分泌的NELL肽；和基本上纯化所述NELL肽。

7.如权利要求5所述的方法，进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。

8.如权利要求6所述的方法，进一步包括测试所述NELL肽诱导骨形成的活性。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述纯化包括层析纯化。

10.如权利要求2所述的方法，其中所述纯化包括层析纯化。

11.一用于在哺乳动物细胞中表达一NELL肽的核酸构成物，所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。

12.如权利要求11所述的核酸，其中所述昆虫分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

13.如权利要求11所述的核酸，其中所述核酸编码NELL1或NELL2，

其中所述NELL1选自下列组包括：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ IDNO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，

其中NELL2选自下列组包括：SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14。

14.如权利要求11所述的核酸构成物，其中所述哺乳动物细胞是CHO细胞。

15.一用于表达一NELL肽的哺乳动物细胞系，所述细胞系包括一核酸构成物，所述核酸构成物在其框架中包含至少一编码至少一NELL肽的核酸及一编码一分泌信号肽的核酸。

16.如权利要求15所述的细胞，其中所述哺乳动物细胞系包括CHO细胞。

17.如权利要求16所述的细胞，其中所述CHO细胞分泌NELL1或NELL2肽。

18.如权利要求16所述的细胞，其中所述分泌信号肽是NELL1或NELL2肽信号序列。

19.如权利要求16所述的细胞，其中所述核酸编码NELL或NELL2肽，

其中所述NELL1选自下列组包括：SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ IDNO：4、SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6和

其中NELL2选自下列组包括：SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14。