[发明专利]包含南美皂皮树皂苷的含脂质颗粒用于治疗癌症的用途

说明书

本发明涉及包含至少一种脂质和至少一种皂苷的含脂质颗粒(例如 脂质体、免疫刺激复合物(iscom)和/或免疫刺激复合物基质(iscom matrix)和posintro)在制备用于治疗癌症的药物中的用途。所述颗粒 也是用于一种或多种使用补偿机制治疗癌症之化合物的递送系统。

本发明还涉及用于治疗癌症的方法，其中将包含至少一种脂质和至 少一种皂苷的含脂质颗粒施用给需要癌症治疗的个体。

另外，本发明涉及包含至少两个部分的药盒，其中一个部分包含含 脂质颗粒，其包含至少一种具有癌细胞杀伤作用的疏水性皂苷级分；另 一个部分包含含脂质颗粒，其包含至少一种刺激并调节免疫应答(例如 抗体产生和细胞介导的免疫)的相对亲水的皂苷级分。

本发明涉及颗粒化制剂中选定的南美皂皮树(Quillaja)组分杀伤并 抑制肿瘤细胞生长(下文称作KGI)这一发现。由于所述颗粒化制剂具 有高的生物利用度，因此它们是优选的。它们可与靶向分子配制在一起， 它们可配置成被人或动物良好接受，而没有由游离形式的溶胞效应 (lytic effect)所造成的副作用。

现有技术

已经描述了含脂质的颗粒例如脂质体和免疫刺激复合物作为抗原 和佐剂的载体。

南美皂皮树皂苷(quillaja saponin)的免疫刺激特性早已为人所知 (Ramon 1926)，并且自二十世纪五十年代以来已经在商品疫苗中使用 了游离形式的南美皂皮树皂苷，其有时与Al(OH)₃组合(Dalsgaard 1978)，Ma等(Ma，Bulger等1994)，(Espinet 1951)。相比于传统的 游离形式，Morein等(Morein，Sundquist等，1984)描述了南美皂皮 树皂苷显著更有效的应用--免疫刺激复合物技术(EP 0 109 942 B1， EP 0 242 380 B1和EP 0 180 564 B1)以及数年后的免疫刺激复合物-基 质技术(Lovgren和Morein，1988)、(EP 0 436 620 B1)。使用iscom 技术，疫苗抗原被掺入由南美皂皮树皂苷、胆固醇和磷脂组成的40nm 复合物中。

已知南美皂皮树皂苷具有抗癌活性。但是，粗制或分级形式的皂苷 本身由于疏水性溶胞效应(hydrophobic-lytic effect)在施用部位导致部 分驻留(partial trapping)而具有普遍的副作用。因此，在癌症治疗中 使用游离形式的皂苷是不现实的。于是，皂苷本身尚未开发成为有用的 癌症药物。

另外，免疫刺激复合物技术已经被开发为包含整合进该免疫刺激复 合物中的癌抗原的癌症疫苗。尽管在这些疫苗中的抗原引发抗体和细胞 介导的应答，但免疫刺激复合物本身发生降解，并且如果个体在以后受 到癌细胞的影响，它将不存在。

现在发现，包含至少一种脂质和至少一种皂苷的含脂质颗粒(例如 免疫刺激复合物和免疫刺激复合物基质)可用于制备治疗癌症的药物。

对于本发明含有脂质和皂苷的颗粒，癌细胞比正常细胞敏感30-40 倍。所述含有脂质和皂苷的颗粒诱导杀伤癌细胞的凋亡。

杀伤作用是由于主要的凋亡诱导物产生的。高浓度诱导更早地发生 凋亡。在用本发明的含脂质颗粒治疗之后，所述细胞脱离了细胞周期， 即它们不继续进行下一个周期。因此，对癌细胞的杀伤是不可逆的。产 生阶段由产生IL-8后发生凋亡这一事实来展示。

在长时间培养癌细胞后，细胞在处理之后不恢复复制，更重要的是， 甚至在接触间断的低生理剂量之后也是如此。

通过多种方法分析癌细胞死亡，所述方法包括台盼兰染色、 AlamarBlue方法的酶代谢抑制、碘化丙锭染色所显现出的坏死改变， 以及Annexin V染色显示的凋亡，如材料和方法中所述。

发明概述

本发明涉及包含至少一种脂质和至少一种皂苷的含脂质颗粒(例如 脂质体、免疫刺激复合物和/或免疫刺激复合物基质和posintro)在制备 于治疗癌症的药物中的用途。

本发明还涉及用于治疗癌症的方法，其中将包含至少一种脂质和至少 一种皂苷的含脂质颗粒施用给需要癌症治疗的个体。