[发明专利]蛋白酶抗性的胰岛素类似物

权利要求书

1.胰岛素类似物，所述胰岛素类似物中相对于母体胰岛素有至少 两个疏水性氨基酸被亲水性氨基酸取代，其中所述取代位于所述母体 胰岛素的两个以上蛋白酶切割位点内部或与其紧密邻近处，其中这样 的胰岛素类似物任选进一步包含一个以上插入突变。

2.权利要求1的胰岛素类似物，其中相对于母体胰岛素，所述胰 岛素类似物的A链包含至少一个突变，所述胰岛素类似物的B链包含 至少一个突变。

3.权利要求1或2中任一项的胰岛素类似物，所述胰岛素类似物 相对于母体胰岛素表现出对一种以上蛋白酶的稳定性提高。

4.权利要求1-3中任一项的胰岛素类似物，所述胰岛素类似物包 含式1的A链氨基酸序列：

Xaa_A(-2)-Xaa_A(-1)-Xaa_A0-Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Xaa_A8-Ser-Ile-Cys- Xaa_A12-Xaa_A13-Xaa_A14-Xaa_A15-Leu-Glu-Xaa_A18-Tyr-Cys-XaaA₂₁-Xaa₂₂

式(1)(SEQ ID No：1)

和式2的B链氨基酸序列：

Xaa_B(-2)-Xaa_B(-1)-Xaa_B0-Xaa_B1-Xaa_B2-Xaa_B3-Xaa_B4-His-Leu-Cys-Gly-Ser- Xaa_B10-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Xaa_B16-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly- Xaa_B24-Xaa_B25-Xaa_B26-Xaa_B27-Xaa_B28-Xaa_B29-Xaa_B30-Xaa_B31-Xaa_B32

式(2)(SEQ ID No：2)

式中

Xaa_A(-2)不存在或为Gly；

Xaa_A(-1)不存在或为Pro；

Xaa_A0不存在或为Pro；

Xaa_A8独立选自Thr和His；

Xaa_A12独立选自Ser、Asp和Glu；

Xaa_A13独立选自Leu、Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、 Pro、Ser和Glu；

Xaa_A14独立选自Tyr、Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、 Pro、Ser和Glu；

Xaa_A15独立选自Gln、Asp和Glu；

Xaa_A18独立选自Asn、Lys和Gln；

Xaa_A21独立选自Asn和Gln；

Xaa_A22不存在或为Lys；

Xaa_B(-2)不存在或为Gly；

Xaa_B(-1)不存在或为Pro；

Xaa_B0不存在或为Pro；

Xaa_B1不存在或独立选自Phe和Glu；

Xaa_B2不存在或为Val；

Xaa_B3不存在或独立选自Asn和Gln；

Xaa_B4独立选自Gln和Glu；

Xaa_B10独立选自His、Asp、Pro和Glu；

Xaa_B16独立选自Tyr、Asp、Gln、His、Arg和Glu；

Xaa_B24独立选自Phe和His；

Xaa_B25独立选自Phe和His；

Xaa_B26不存在或独立选自Tyr、His、Thr、Gly和Asp；

Xaa_B27不存在或独立选自Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、 Arg、Pro、Ser和Glu；

Xaa_B28不存在或独立选自Pro、His、Gly和Asp；

Xaa_B29不存在或独立选自Lys和Gln；

Xaa_B30不存在或为Thr；

Xaa_B31不存在或为Leu；

Xaa_B32不存在或为Glu；

C端可任选衍生为酰胺；

其中所述A链的氨基酸序列和所述B链的氨基酸序列通过所述A 链7位半胱氨酸与所述B链7位半胱氨酸之间的二硫键，以及所述A 链20位半胱氨酸与所述B链19位半胱氨酸之间的二硫键连接，且其 中所述A链6位和11位的半胱氨酸由二硫键连接；

其中任选所述A链氨基酸序列N端通过含3-7个氨基酸的氨基酸 序列与所述B链氨基酸序列C端连接，以形成单链胰岛素分子，其中 任选所述B链N端延伸1-10个氨基酸；

其中若Xaa_A8为Thr且Xaa_A12为Ser且Xaa_A13为Leu且Xaa_A14为 Tyr，则Xaa_A15为Glu或Asp；且

其中若Xaa_B24为Phe且Xaa_B25为Phe且Xaa_B26为Tyr且Xaa_B27为Thr且Xaa_B28为Pro，则Xaa_B29为Gln。