[发明专利]包含来自于四株流感病毒的抗原的疫苗

说明书

本文所引用的所有文献都已完整纳入本文作为参考。

技术领域

本发明属于防御流感病毒感染的疫苗流域，特别是包含来自于3株以上病毒 的抗原的疫苗。

发明描述

申请人已经认识到目前所用的三价疫苗所具有的许多缺陷都是因为在其生 产过程中使用鸡蛋造成的。从订货交付时间和产量量方面来说，以鸡蛋为基础的 生产不能很好地适用于提高抗原量，而这是特定季节所需要的。目前以鸡蛋为基 础的生产方法要求病毒能适应在鸡蛋内生长，而这会延长开始生产时的耗时期， 并且会引入选择压力而降低疫苗株与流行株之间的匹配程度。另外，B型流感毒 株不能在鸡蛋内良好生长，高增长的重组子无法获得。2003/04季的H3N2错配 已经很好地证明了目前的方法绝对需要在鸡蛋内生长，这主要是由于相关的Fuji 样毒株最初不是用鸡蛋分离的而引起的。为了克服这些缺陷，可用细胞培养物代 替鸡蛋来培养病毒。因此，在某些实施方式中，本发明的疫苗是用在细胞培养物 而不是在鸡蛋中生长的病毒制备的。

以鸡蛋为基础的技术无法提高特定季节所需要的抗原产量也可以通过降低 疫苗的抗原使用量来解决。减少抗原量的一种途径是使用佐剂。因此，在某些实 施方式中，本发明的疫苗包含佐剂。

在某些实施方式中，疫苗所含各流感毒株的血凝素(HA)的含量基本相同(例 如，约1∶1∶1∶1)。每株的HA的含量约为15μg/剂，或者在某些实施方式中低于15μg/ 剂(例如，低于10μg/剂)或高于15μg/剂(例如，＞20μg/剂、＞25μg/剂等，如约30μg/ 剂)。在某些实施方式中，疫苗内所含的不同毒株HA的含量不同。

在某些实施方式中，疫苗不是裂解或完整病毒体的灭活疫苗，而是活的或纯 化的糖蛋白疫苗。

因此，本发明提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原的疫苗，其中至少 一株病毒是在细胞培养物内生长的。优选的是所有毒株都是在细胞培养物内生长 的。

本发明还提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原的疫苗，所述疫苗不含 卵清蛋白(ovalbumin)。该组合物还可以不含其他鸡蛋蛋白(例如卵类粘蛋白 (ovomuoid))和鸡DNA。

本发明还提供了生产疫苗的方法，该方法包括步骤：(i)在细胞培养物内培养 四种不同的流感毒株；(ii)从步骤(i)培养的每一毒株制备抗原组合物；以及(iii)将 抗原组合物(例如与药用载体混合)混合以生产疫苗。

本发明还提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原并包含佐剂的疫苗。

本发明还提供了生产疫苗的方法，该方法包括步骤：(i)培养四种不同的流感 毒株；(ii)从步骤(i)培养的每一毒株制备抗原组合物；以及(iii)将抗原组合物与佐 剂和药用载体混合以生产疫苗。

本发明还提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原的疫苗，其中的抗原不 是裂解或完整病毒体。抗原可以是活流感病毒或纯化的糖蛋白，即，疫苗包含来 自于至少四株流感病毒的纯化血凝素。

本发明还提供了生产疫苗的方法，该方法包括步骤：(i)培养四种不同的流感 毒株；(ii)从步骤(i)扩增的每一毒株制备抗原组合物，所述抗原组合物既不是裂解 病毒体也不是完整病毒体；以及(iii)将抗原组合物与佐剂和药用载体混合以生产 疫苗。

本发明还提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原的疫苗，其中疫苗所含 各流感毒株的血凝素(HA)的含量基本相同。每一毒株的HA的含量与平均HA含 量/株的差值在所述平均值的10％以内。较好的是，所述含量为15μg/株。

本发明还提供了包含来自于至少四株流感病毒的抗原的疫苗，所述疫苗包含 aμg来自于第一毒株的血凝素(HA)、bμg第二毒株的HA、cμg第三毒株的HA 和dμg第四毒株的HA，其中，a和b基本相同，c和d基本相同，但是a和c显 著不同。a和b的值与a和b的平均值(“a/b平均值”)的差值在该平均值的10％ 以内。c和d的值与c和d的平均值(“c/d平均值”)的差值在该平均值的10％以 内。a/b平均值与c/d平均值之间的差异为两者中低值的至少25％(例如，至少33％、 至少40％、至少50％)。