[发明专利]O-乙酰化形式GD2神经节苷酯特异性的单克隆抗体用于治疗一些癌症的用途

说明书

发明领域

本发明提供使用表达O-乙酰化形式的GD2神经节苷酯的细胞用于癌症的诊断和治疗的新方法。这些方法基本上包括使用识别O-乙酰化GD2且不识别健康细胞(sound cells)和外周神经系统(peripheral nervous system)的神经纤维的重组单克隆抗体或其片段。这些新方法将对癌细胞更具特异性，并且与先前使用的治疗这些癌症的抗体和衍生物相比会降低治疗的毒性。 

现有技术

肿瘤细胞在它们的表面上具有许多抗原决定簇。在这些抗原决定簇中，一些是肿瘤特异性的抗原。这些肿瘤抗原主要在癌细胞表面表达，或者甚至只在癌细胞表面表达。 

这些人肿瘤抗原通过不同物种如小鼠等的免疫系统诱导被称为抗体的分子的产生，抗体的特征在于特异性识别它们所源自的抗原分子。 

这种单克隆抗体和它的人肿瘤抗原之间的特异性识别对于癌症免疫寻靶尤其有利。事实上，这使得用于诊断的检测剂或用于治疗肿瘤的毒剂在患病组织或器官上浓缩成为可能。这些检测剂或毒剂可以任选地包括在抗体施用之前或之后与抗体人工连接的放射性化合物、化学化合物或生物学化合物。这些试剂(agent)也可以是通过抗体募集至肿瘤细胞的天然存在于患者体内的生物学化合物(补体、趋化因子、细胞因子、细胞毒性细胞的组分，例如T或NK淋巴细胞)。 

神经节苷酯是细胞膜的成分，其中一些神经节苷酯已经被表征为肿瘤抗原。能够证明GD2神经节苷酯在神经外胚层来源的人患癌症中高表达，所述癌症诸如特别是黑素瘤(melanoma)、成胶质细胞瘤(glioblastoma)、小细胞肺癌(small cell lung carcinoma)和成神经细胞瘤(neuroblastoma)。上述肿瘤病理学的列举并非穷举。成视网膜细胞瘤(retinoblastoma)和骨肉瘤(osteosarcoma)也表达GD2神经节苷酯。一些卵巢癌也表达GD2神经节苷酯。 GD2神经节苷酯是一种由神经酰胺与寡糖组合形成糖脂酸(glycolipid acid)，所述寡糖具有葡萄糖半乳糖N-乙酰-半乳糖胺序列。与半乳糖分子连接的是两个唾液酸分子。可以通过添加O-乙酰部分来修饰末端的唾液酸以产生O-乙酰化GD2。依靠GD2特异性抗体(该抗体也识别GD2的O-乙酰化形式)可以显示特定类型的癌症(特别是神经外胚层来源的癌症)以不同的比例表达GD2及其O-乙酰化形式O-乙酰化GD2。 

已经描述了在小鼠中产生的几种单克隆抗-GD2抗体。分别属于IgG2a和IgG3小鼠免疫球蛋白的抗-GD2单克隆抗体14.G2a和3F8的治疗用途已经在临床研究中进行了试验。 

这些研究已经强调了小鼠单克隆抗体本身固有的几种不良副作用。 

这些不良反应之一是变应性或过敏性反应，这可能归因于人对小鼠抗体产生的免疫应答。 

为了解决在小鼠中产生的单克隆抗体的这种免疫原性问题，可以使用遗传工程技术来制备嵌合抗体。“嵌合”抗体指经遗传修饰的抗体，其中由人抗体的相应部分来取代编码小鼠抗体的遗传信息中重要性不等(more or lessimportant)的部分。通常，鼠抗体(murine antibody)的重链和轻链的可变区(V_H和V_L)是保守的，而抗体分子的剩余部分源自人抗体。这些嵌合抗体保留了小鼠单克隆抗体固有的对肿瘤抗原的特异性识别，同时具有人抗体固有的物理性质和效应物性质。因此，临床研究已经证明了嵌合抗体ch.14G2a和ch.14.18与它们所源自的小鼠单克隆抗体相比展现降低的免疫原性和增加的血清半衰期。另外，还证明了在将小鼠抗-GD2单克隆抗体嵌合化时，它们展现增加的募集人效应细胞的能力，而小鼠抗体仅具有有限的募集这些人效应细胞的能力。 

使鼠抗体对人抗体具有同一性(L′identification des anticorps murins auxanticorps humains)可以进一步通过仅保留所谓的CDR区或“互补决定区”中的鼠抗体氨基酸来进行，CDR区或“互补决定区”包含抗原附着位点并且因此确定抗体特异性。“人源化”抗体意指经遗传修饰的抗体，其中仅保留起始小鼠抗体的CDR氨基酸以及任选地接近这些CDR区的少数氨基酸，并且其中所述分子的剩余部分源自人抗体。 

现有技术的缺陷