[发明专利]芳族1.4-二羧基酰胺及其用途

说明书

本发明涉及抑制β-连接素和BCL9和/或BCL9L蛋白质间相互作用的芳 族1，4-二羧基酰胺，和它们用于制备药物组合物和治疗某些疾病的用途。

通常，本发明涉及Wnt转导通路的抑制剂。这种抑制剂能被使用干细胞研 究或特征在于异常Wnt激活的疾病治疗，例如癌症、骨和软骨疾病。已经广泛 报道，结肠直肠癌、肝细胞癌、乳癌、黑素瘤、间皮瘤、淋巴瘤和白血病的 Wnt通路的病理激活。此外，由于Wnt通路在T-细胞发育中也具有基本功能 (Staal，Meeldijk等人2001；Staal and Clevers 2003)，在此公开的Wnt信号转导通 路抑制剂也能被用作免疫抑制的药物，例如在器官移植后或处理某些自身免疫 疾病，例如红斑狼疮、多发性硬化和变形性关节炎。

通过激活相应细胞中具体目标基因的表达，Wnt/Wg蛋白质对于脊椎动物 发育发挥许多它们的作用。已经识别几种这些目标基因，它们的一些功能相应 于控制细胞生长、分化和继续存活(He，Sparks等人1998；Crawford，Fingleton 等人1999；Tetsuand Mc Cormick 1999；Kolligs，Nieman等人2002；Shtutman， Zhurinsky等人2002)。

已经具有通过磷酸化标记β-连接素降解的复杂方法。重要的是，肿瘤抑制 基因APC和Axin是这种β-连接素破坏复合物的主要组分。通过Wnt通路的激 活，β-连接素避免磷酸化反应，在细胞-血浆中聚集，进入细胞核，与TCF蛋白 质和最近识别的Lgs/BCL9[Kramps，T.等人，2002]蛋白质结合，以作为目标基 因的转导共激活物。

这种连续抑制关键转换(transducer)的机构，对于其抑制组分的变异非常敏 感。实际上，已经发现Wnt信号的下游组分中的变异与各种人体癌症有关 (Kinzler和Vogelstein 1996；Miller，Hocking等人，1999)。例如，种系APC变异 能引起许多良性结肠直肠瘤，其中一些发展成癌症。APC基因的体细胞变异与 85％突发结肠直肠腺瘤和癌有关(Kinzler和Vogelstein 1996)，已经在许多人体 癌症，例如结肠直肠癌、肝细胞癌和黑素瘤中发现β连接素磷酸化位置的变异 (Morin，Sparks等人，1997；Rubinfeld，Robbins等人，1997)(Caca，Kolligs等人， 1999)，已经在肝细胞癌中发现Axin的变异(Satoh，Daigo等人，2000)。此外， 上游组分像LRP5、sfrps、WIF-1、DKK或Wnt配位基的几种变异和/或表达变 化，不仅与癌症有关，而且与骨和软骨疾病有关。由于所有这些变异导致细胞 核β-连接素的积聚，这种蛋白质和其相互反应的对象(partners)成为抑制Wnt相 关基因表达的有吸引力的目标。

实际上，已经在各种专利申请中公开以β-连接素-Tcf4相互作用为目标的 Wnt通路抑制剂和发现这种抑制剂的方法。国际专利申请WO 98/42296公开 了纯化的蛋白质和筛选抑制剂的常规方法。国际专利申请WO 02/44378描述了 筛选Tcf-β-连接素抑制剂的常规方法。国际专利申请WO 03/006447涉及tcf4-β- 连接素抑制剂。国际专利申请WO 02/096430公开了作为小分子β-连接素抑制 剂的头孢菌素衍生物。国际专利申请WO 01/19353A2公开使用3D模式Tcf4-β- 连接素相互作用在连接素中“可命中目标的”口袋(pocket)。也描述了在基于所述 相互作用的硅筛选过程，以识别抑制剂及通过这种方法识别的许多抑制剂。

上述的方法的主要缺点是β-连接素-Tcf4的相互作用。特别是，这种蛋白质 -蛋白质相互作用的表面非常大，至少部分与其它β-连接素反应对象，像 ECadherin和APC合用(Graham，Weaver等人，2000；EklofSpink，Fridman等人， 2001；Huber和Weis2001；Poy，Lepourcelet等人，2001)，这导致关于其特异性的 严重问题。因此，需要Wnt通路替换目标。