[发明专利]新的N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶以及使用该酶生产CMP-神经氨酸的方法有效
| 申请号： | 200780046422.0 | 申请日： | 2007-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN101668850A | 公开（公告）日： | 2010-03-10 |
| 发明（设计）人： | 禹真锡;宋在京;金秉祺;姜善烨;金大熙;张庆淳;梁智英;郑永洙;徐元敏;吉泰建;沈相熙;许仁康 | 申请（专利权）人： | 基因化学株式会社 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 韩国;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 乙酰 葡糖 表异构酶 以及 使用 生产 cmp 神经 氨酸 方法 | ||
1.一种制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，所述方法包括：
将含有下列物质的反应混合物进行反应：(i)胞苷5’-磷酸(CMP)，(ii)核苷三磷 酸(NTP)，(iii)乙酰磷酸(Pi)，(iv)N-乙酰-D-葡糖胺和(v)丙酮酸，所述反应在 下列物质存在下进行：(a)N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶(GlcNAc2-表异构酶)， (b)N-乙酰神经氨酸醛缩酶(NeuNAc醛缩酶)，(c)胞苷5’-磷酸激酶(CMP激酶)， (d)醋酸激酶和(e)CMP-N-乙酰神经氨酸合成酶(CMP-NeuNAc合成酶)；并且 回收所述CMP-N-乙酰神经氨酸。
2.根据权利要求1的制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述 核苷三磷酸(NTP)由乙酰Pi和醋酸激酶再生。
3.根据权利要求1或2的制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于， 所述核苷三磷酸(NTP)是胞苷三磷酸(CTP)。
4.根据权利要求1的制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述 N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶的氨基酸序列为SEQ ID NO：2。
5.根据权利要求1的制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述 N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶、N-乙酰神经氨酸醛缩酶、胞苷5’-磷酸激酶、醋 酸激酶和CMP-N-乙酰神经氨酸合成酶被固定在载体上。
6.根据权利要求1的制备CMP-N-乙酰神经氨酸的方法，其特征在于，所述 N-乙酰葡糖胺-2-表异构酶、N-乙酰神经氨酸醛缩酶、胞苷5’-磷酸激酶、醋 酸激酶和CMP-N-乙酰神经氨酸合成酶分别由碱基序列SEQID NO：1， SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：11以及SEQ ID NO：14编码。
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