[发明专利]冻干法稳定疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及药物组合物，例如疫苗，以及制备和使用这样的组合物的方法。

发明背景

接种疫苗是医学最伟大的成就之一，使数以百万计的人免受毁灭性疾病的影响。在疫苗广泛使用前，传染病每年仅在美国就杀死了数以千计的儿童和成年人，同样在世界各地杀死了更多得多的人。接种疫苗广泛用于预防和治疗细菌、病毒和其他病原体所致的感染，接种疫苗也是用于预防和治疗癌症的方法。疫苗接种中使用一些不同的方法，包括灭活病原体，活减毒病原体和灭活病原体亚单位给药。就病毒感染而言，已发现活疫苗带来最有效和持久的保护性免疫应答。

已经开发出抗黄病毒的活减毒疫苗，黄病毒是通常通过感染的蚊子或壁虱传播的小的包膜正链RNA病毒。黄病毒科家族的黄病毒属包括大约70种病毒，其中许多如黄热病(YF)、登革热(DEN)、日本脑炎(JE)和森林脑炎(TBE)病毒是主要的人类病原体(综述Burkeand Monath，Fields Virology，4^th Ed.，1043-1126，2001)。

不同的方法已用于开发抗黄病毒的疫苗。就黄热病病毒而言，例如两种疫苗(黄热病17D和法国嗜神经疫苗)已通过连续传代进行开发(Monath，“Yellow Fever，”In Plotkin and Orenstein，Vaccines，3rded.，Saunders，Philadelphia，pp.815-879，1999)。用于接种疫苗的黄病毒减毒的另一方法包括构建包括两种不同黄病毒组分的嵌合黄病毒。了解这种嵌合体如何构建需要解释黄病毒基因组的结构。

黄病毒蛋白是通过翻译单个、长开放阅读框生成多蛋白，之后是一系列复杂的宿主以及病毒蛋白酶对多蛋白的翻译后蛋白水解，生成成熟的病毒蛋白(Amberg et al.，J.Virol.73：8083-8094，1999；Rice，“Flaviviridae，”In Virology，Fields(ed.)，Raven-Lippincott，New York，1995，Volume I，p.937)。病毒结构蛋白以C-prM-E的顺序在多蛋白中排列，其中“C”是衣壳，“prM”是病毒包膜结合M蛋白的前体，“E”是包膜蛋白。这些蛋白质出现在多蛋白的N端区域，而非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5)位于多蛋白的C端区域。

已制备的嵌合黄病毒包括来自不同黄病毒的结构和非结构蛋白。例如所谓的ChimeriVax^TM技术采用黄热病17D病毒衣壳蛋白和非结构蛋白，以递送其他黄病毒的包膜蛋白(prM和E)(参见例如Chambers et al.，J.Virol.73：3095-3101，1999)。这项技术已用来开发针对登革热、乙型脑炎(JE)、西尼罗(WN)和圣路易斯脑炎(SLE)病毒的候选疫苗(参见例如Pugachev et al.，New GenerationVaccines，3^rd ed.，Levine et al.，eds.，Marcel Dekker，New York，Basel，pp.559-571，2004；Chambers et al.，J.Virol.73：3095-3101，1999；Guirakhooet al.，Virology 257：363-372，1999；Monath et al.，Vaccine 17：1869-1882，1999；Guirakhoo et al.，J.Virol.74：5477-5485，2000；Arroyo et al.，Trends Mol.Med.7：350-354，2001；Guirakhoo et al.，J.Virol.78：4761-4775，2004；Guirakhoo et al.，J.Virol.78：9998-10008，2004；Monath etal.，J.Infect.Dis.188：1213-1230，2003；Arroyo et al.，J.Virol.78：12497-12507，2004；和Pugachev et al.，Am.J.Trop.Med.Hyg.71：639-645，2004)。