[发明专利]全局转录机器的改造无效
申请号: | 200780050968.3 | 申请日: | 2007-12-07 |
公开(公告)号: | CN101743310A | 公开(公告)日: | 2010-06-16 |
发明(设计)人: | 哈尔·S·阿尔珀;格里戈里·斯特凡诺普洛斯;杰拉尔德·芬克 | 申请(专利权)人: | 麻省理工学院;怀特黑德生物医学研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12P7/06 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 顾晋伟;彭鲲鹏 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 全局 转录 机器 改造 | ||
1.包含突变的SPT15基因的经遗传修饰的酵母菌株,任选地,其中在引入所述突变SPT15基因或突变内源SPT15基因之前,不含该突变SPT15基因的该酵母菌株与野生型酵母菌株相比具有提高的乙醇和/或葡萄糖耐受性和/或乙醇生产性,并且其中相对于野生型酵母和不含该突变SPT15基因的酵母菌株而言,所述突变的SPT15基因进一步提高乙醇和/或葡萄糖耐受性和/或乙醇生产性。
2.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因在F177、Y195和K218中两个或更多位置上包含突变。
3.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因在F177、Y195和K218中所有三个位置上包含突变。
4.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因包含突变F177S、Y195H和K218R中的两个或更多个或者该突变体氨基酸的保守性替换。
5.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因包含突变F177S、Y195H和K218R或者所述突变体氨基酸的保守性替换。
6.权利要求1-5中任一项的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因是重组表达的。
7.权利要求1-6中任一项的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因在质粒上引入酵母细胞中。
8.权利要求1-6中任一项的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因引入酵母细胞的基因组DNA中。
9.权利要求1-6中任一项的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述突变的SPT15基因是酵母细胞基因组DNA中被原位突变的内源基因。
10.权利要求1-9中任一项的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述酵母菌株选自酵母菌(Saccharomyces spp.)、裂殖酵母(Schizosaccharomycesspp.)、毕赤酵母(Pichia spp.)、法夫酵母(Paffia spp.)、克鲁维酵母(Kluyveromyces spp.)、假丝酵母(Candida spp.)、Talaromyces spp.、酒香酵母(Brettanomyces spp.)、Pachysolen spp.、德巴利酵母(Debaryomycesspp.)和工业多倍体酵母菌株。
11.权利要求10的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述酵母菌株是酿酒酵母(S.cerevisiae)菌株。
12.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述不含该突变的SPT15基因的酵母菌株是这样的酵母菌株,其经遗传改造、选择而具有用于增强乙醇生产的一种或多种期望的表型,或者已知具有这样的表型。
13.权利要求12的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述一种或多种期望的表型是乙醇耐受性和/或提高的C5和C6糖发酵。
14.权利要求13的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述提高的C5和C6糖发酵的表型是提高的木糖发酵。
15.权利要求14的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述经遗传修饰的酵母菌株转化有外源木糖异构酶基因、外源木糖还原酶基因和外源木糖醇脱氢酶基因和/或外源木酮糖激酶基因。
16.权利要求14的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述经遗传修饰的酵母菌株包含进一步的遗传修饰,其为非特异性或特异性的醛糖还原酶基因的缺失、木糖醇脱氢酶基因的缺失和/或木酮糖激酶的过表达。
17.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述不含该突变SPT15基因的酵母菌株是呼吸缺陷型的酵母菌株。
18.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述酵母菌株显示Spt3的正常表达或提高表达。
19.权利要求1的经遗传修饰的酵母菌株,其中所述酵母菌株不是Spt3敲除或无效突变体。
20.用于产生权利要求1-19中任一项的经遗传修饰的酵母菌株的方法,包括向酵母菌株中引入所述突变SPT15基因的一个或多个拷贝,和/或在酵母细胞的基因组DNA中原位突变内源基因。
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