[发明专利]衍生自重组酵母的具有止血活性的微泡及其用途

权利要求书

1.携带组织因子(TF)的酵母来源的微泡，其包含(i)酵母膜，以及(ii)具有促凝活性的组织因子(TF)蛋白或其变异体，其中所述具有促凝活性的组织因子(TF)蛋白或其片段的一部分被整合到所述膜内。

2.如权利要求1所述的酵母来源的微泡，其中所述具有促凝活性的TF因子蛋白或其变异体是糖基化的。

3.如权利要求1或2所述的酵母来源的微泡，其中所述具有促凝活性的TF因子蛋白或其变异体是融合蛋白的一部分，所述融合蛋白包含含有所述具有促凝活性的TF蛋白或其片段的第一区域，其与包含另一肽或蛋白的第二区域结合。

4.如权利要求3所述的酵母来源的微泡，其中所述融合蛋白包含具有促凝活性的TF蛋白或其变异体，以及标签。

5.如权利要求4所述的酵母来源的微泡，其中所述标签是组氨酸标签(His-标签)。

6.如权利要求1-5中任一权利要求所述的酵母来源的微泡，所述微泡包含成熟TF蛋白，优选人成熟TF蛋白。

7.如权利要求1-6中任一权利要求所述的酵母来源的微泡，所述微泡包含具有促凝活性的截短TF蛋白，在所述截短TF蛋白中负责与FVIIa(aa 32-174)结合的结构域全部或部分缺失。

8.如权利要求7所述的酵母来源的微泡，其中所述截短TF蛋白包含与因子X相互作用的结构域、跨膜区和胞质尾区，并部分或全部缺失负责与FVIIa结合的结构域。

9.如权利要求8所述的酵母来源的微泡，其中所述截短TF蛋白包含人TF的与因子X相互作用的结构域(aa 174-251)、跨膜区(aa252-274)和胞质尾区(aa 275-295)，以及额外的组氨酸标签。

10.如权利要求1-6中任一权利要求所述的酵母来源的微泡，其中所述TF包含至少一个非功能性N-糖基化位点。

11.如权利要求10所述的酵母来源的微泡，其中一个或多个所述非功能性N-糖基化位点是与成熟人rTF中的11-13位的NLT、124-126位的NVT或137-139位的NNT的N-糖基化位点对应的那些位点。

12.如权利要求11所述的酵母来源的微泡，其中所述TF在与成熟人TF中的11、124或137位对应的位置处携带Asn残基的一个或多个Asn至Ala的突变。

13.如权利要求1-12中任一权利要求所述的酵母来源的微泡，其中所述具有促凝活性的TF蛋白或其变异体的N-末端结构域朝向所述膜的外质侧。

14.如权利要求1-12中任一权利要求所述的酵母来源的微泡，其中所述具有促凝活性的TF蛋白或其变异体的N-末端结构域朝向所述膜的内质侧。

15.组合物，其包含权利要求1-14中任一权利要求所述的携带TF的酵母来源的微泡。

16.如权利要求1-14中任一权利要求所述的携带TF的酵母来源的微泡，其作为药物。

17.如权利要求16所述的携带TF的酵母来源的微泡，其作为具有促凝活性的药物。

18.药物组合物，其包含权利要求1-14中任一权利要求所述的携带TF的酵母来源的微泡和药物可接受的介质。

19.如权利要求1-14中任一权利要求所述的携带TF的酵母来源的微泡，其用于治疗个体出血。

20.如权利要求19所述的携带TF的酵母来源的微泡，其用于局部治疗个体出血。

21.如权利要求1-14中任一权利要求所述的携带TF的酵母来源的微泡，其用于治疗需要促进个体细胞迁移和/或血管生成的疾病。