[发明专利]南瓜蛋白2及其制备方法和用途有效
| 申请号： | 200810001317.1 | 申请日： | 2008-01-03 |
| 公开（公告）号： | CN101386644A | 公开（公告）日： | 2009-03-18 |
| 发明（设计）人： | 陈明晃 | 申请（专利权）人： | 中国科学院福建物质结构研究所 |
| 主分类号： | C07K14/415 | 分类号： | C07K14/415;C07K1/14;A61K38/16;A61P35/00;A61P31/18 |
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| 地址： | 350002福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 南瓜 蛋白 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种从南瓜中提取的核糖体失活蛋白一南瓜蛋白2，其特征在于：分子 量为27183Da，其N端氨基酸顺序为：BVSFRLSSATSSSYGTFISNLRFALPKERKLY。
2.根据权利要求1的一种南瓜蛋白2的制备方法，包括缓冲液抽提、调酸 和强阳离子柱梯度洗脱，其特征在于：通过包括以下四个步骤快速分离纯化得 到南瓜蛋白2：
(1)去掉皮和种子的南瓜瓜瓤加pH4.5，10mM醋酸缓冲液进行匀浆；
(2)匀浆液用50％的冰醋酸调pH 3.5-4.5，然后在4℃条件下，16000×g 离心30’，收集上清液；
(3)加样到pH4.5，20mM醋酸缓冲液平衡的强阳离子柱上，280nM实时 检测，用pH4.5，20mM醋酸缓冲液洗至基线，再用pH6.5，20mM磷酸盐缓冲 液洗至基线，然后用0-0.6M NaCl在pH 6.5，20mM磷酸盐缓冲液进行梯度 洗脱，收集第1峰；
(4)合并峰1，用50％的冰醋酸调pH4.0，同时加2倍体积的pH4.5，20mM 醋酸缓冲液，再加样到用pH4.5，20mM醋酸缓冲液平衡的强阳离子柱上，280nM 实时检测，用pH4.5，20mM醋酸缓冲液洗至基线，再用pH7.5，10mM磷酸盐 缓冲液洗至基线，然后用0-1M NaCl在pH7.5，10mM磷酸盐缓冲液中进 行梯度洗脱，收集主要的峰，该峰就是高度纯化的南瓜蛋白2。
3.根据权利要求1的一种南瓜蛋白2的用途，其特征在于：该蛋白作为制 备治疗结肠癌药物的应用。
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