[发明专利]用Phyllobacterium sp.nov.921F菌株生产新型细菌胞外多糖

说明书

技术领域

生物技术

背景技术

目前已报告的能够产生胞外多糖的菌株有以下几类：铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)产生的D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、L-鼠李糖和D-葡萄糖醛酸组成的酸性多糖，Chlamydomonas ulvaensis产生的葡萄糖、木糖构成的胞外多糖，以及结合杆菌(M.tuberculosis)的D-甘露糖、阿拉伯糖组成的多糖。链球菌S.equi和S.zooepidernicus能够产生由葡萄糖醛酸和氨基葡萄糖组成的透明质酸。嗜热链球菌(S.Thermophilus)能够产生由D-半乳糖、D-葡萄糖和N-乙酰半乳糖构成重复单位的多糖。野生油菜黄单孢菌(Xanthomonas Campestris)能够产生黄原胶，结构由D-葡萄糖、D-甘露糖、D-葡萄糖醛酸组成。也有少数的种能够产生同质聚糖，例如明串珠菌属(Leuconostoc sp.)和足球菌属(Pediococcus sp.)产生的胞外葡聚糖；醋酸杆菌(A.xylinum)产生的胞外细菌纤维素等。

Phyllobacterium sp.nov.921F能够产生胞外多糖，据本发明人通过查阅资料、文献检索所知，目前并没有关于叶杆菌Phyllobacterium产生的胞外多糖进行研究报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种菌株Phyllobacterium sp.nov.921F，并利用该菌株生产细菌胞外多糖的方法。

本发明分离纯化出一株来源于真菌子实体表面的菌株Phyllobacterium sp.nov.921F，具有产生胞外多糖的特性，保藏单位简称CCTCC，保藏号为M205043。本发明的特点是：

首次分离出一株具有产生细菌胞外多糖的Phyllobacterium sp.nov.921F菌株。该菌株革兰氏阴性，直杆状，0.4-0.8μm×0.8-2.0μm。以1至几根极毛或长波状的侧生鞭毛运动。好氧，以分子氧为末端电子受体的严格好氧呼吸代谢类型。最适温度为28～34℃。接触酶阳性。化能异养菌，利用各种糖葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、阿拉伯糖以及有机酸(丙二酸盐、葡萄糖酸盐)作为碳源。可利用铵盐、硝酸盐和多数氨基酸类作为氮源。不水解淀粉，果胶和纤维素。根据伯杰氏细菌鉴定手册第九版的结果，本发明涉及菌株的形态和生理生化特征大部分与叶杆菌属(Phyllobacterium sp.)相符。根据伯杰氏手册第九版，本发明的菌株的形态和生理生化特征与叶杆菌属一致，确定其为叶杆菌属，但其形态和生理生化特征与该属已知菌相比有所不同。(该菌株与叶杆菌属其他菌种的特征对比见表1)对该菌种进行16SRNA基因测序，其结果与Genebank中Phyllobacterium的序列进行比对相似度最高，其相似度为98.7％。该菌种具有营养要求简单，易培养，胞外多糖产量高的特点。该多糖由葡萄糖、半乳糖和丙酮酸取代基形成的重复单元组成，摩尔组成比为1：1：1。该多糖不同于以往任何工业生产菌株所产生的多糖，是一种可以实现工业应用的新型细菌胞外多糖。

附图说明

图1：标准糖气相色谱分析结果。

图2：Phyllobacterium sp.nov.921F菌株生产胞外多糖酸解终产物气相色谱分析结果。

图3：分子量为805组分多糖的二级质谱分析结果。

图4：分子量为1200组分多糖的二级质谱分析结果。

具体实施方式

1.菌株的分离纯化：