[发明专利]环黄芪醇的单葡萄糖苷、其制备方法、药物组合物和应用

权利要求书

1.一种制备环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷的方法，包括下述步骤：

a.使用黄芪甲苷或按常规方法制备的黄芪提取物作为原料，往其中加入适当溶剂配制药液；

b.加入水解酶在恒温下进行水解得到水解液；

c.水解液经大孔吸附树脂分离；

d.纯化分离得到的产物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，当原料为黄芪甲苷时，黄芪甲苷在溶液中的浓度为0.01％-1％W/V，优选浓度为0.01-0.5％W/V，更优选浓度为0.01-0.1％W/V；当原料为黄芪提取物时，溶液浓度为提取物∶溶液＝1∶2-1∶1000W∶V，优选比例是提取物∶溶液＝1∶15-1∶1000W∶V。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述溶剂选自水、低级醇或含水低级醇，所述低级醇优选是选自碳数为1-3的一元醇，优选选自乙醇和甲醇，更优选乙醇。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述药液中醇的浓度是1-30％V/V，优选5-20％V/V。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述水解酶选自β-糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、橙皮苷酶或这些酶与纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、糖化酶、果胶酶、淀粉酶中一种或数种酶的混合物，优选β-糖苷酶、β-葡萄糖苷酶或木聚糖酶，更优选木聚糖酶。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，当底物为黄芪甲苷时，底物与酶的比例为1∶1-50W∶W；和当底物为药材提取物时，酶与底物配比为1∶100-10∶1W∶W，优选配比为1∶50-10∶1W∶W。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，所述水解在40-55℃下恒温进行12-72小时，优选48-72小时，和溶液适合的βH值为4-7。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述分离按如下步骤进行：

水解液经苯乙烯为骨架的大孔吸附树脂，先用水洗脱1-2个柱体积，后用0.5-2％的碱溶液洗脱1-2个柱体积，再用20-40％的乙醇溶液洗脱1-3个柱体积，最后用70-95％乙醇洗脱1-3个柱体积，收集高浓度乙醇洗脱部分，减压浓缩，其中所述原料∶树脂比当原料为提取物时优选为1∶20-4∶1g∶ml，更优选1∶10-3∶1g∶ml；当原料为黄芪甲苷时优选为0.1∶1-20∶1mg∶ml，更优选为2∶1-10∶1mg∶ml。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述纯化按如下步骤进行：

过滤分离得到的产物，用低级醇或含水低级醇转溶，过滤，浓缩滤液并放置至析出结晶，过滤得结晶，再用低级醇或含水低级醇重结晶，得纯度95％以上的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷，其中所述低级醇优选是碳数1-5的一元醇或多元醇，更优选选自甲醇和乙醇。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法制备的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷。

11.一种药物组合物，包含治疗有效量的根据权利要求10所述的环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷和药学上可接受的辅料，其中所述药学上可接受的辅料优选选自稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、稳定剂和溶剂。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其为固体口服制剂、液体口服制剂、注射剂、膜剂或气雾剂的形式，其中所述固体口服制剂优选为普通片剂、分散片、肠溶片、颗粒、胶囊、滴丸或散剂，或缓控释制剂；所述缓控释制剂优选为缓控释片剂、颗粒或胶囊；所述液体口服制剂优选为口服液或乳剂；和所述注射剂优选为小水针、输液或冻干粉针。