[发明专利]一种可诱生细胞免疫应答的真核表达载体及其疫苗

说明书

本申请是“一种可诱生细胞免疫应答的共表达载体和真核表达载体”发明的分案申请。申请日2006年8月18日，申请号2006100301998，发明名称：一种可诱生细胞免疫应答的共表达载体和真核表达载体。

技术领域

本发明涉及真核表达载体，具体地说关于一种可诱生细胞免疫应答的真核表达载体及其疫苗。

背景技术

DNA疫苗(DNA vaccine)又称核酸疫苗、基因疫苗(gene vaccine)，是指将编码某种目的抗原蛋白的外源基因插入真核细胞表达质粒，直接导入动物体细胞内，并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，从而达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗不仅能刺激机体产生特异性的体液免疫，还能诱导产生特异性的具有细胞毒杀伤性功能的CTL效应(细胞免疫)，并可直接清除带有目的抗原的靶细胞，因此对病毒、细胞内寄生的细菌和寄生虫所引起的传染病具有广阔的治疗前景。表位疫苗(epitope vaccine)是用抗原表位制备的疫苗，包括合成肽疫苗(synthetic peptide vaccine)、重组表位疫苗(recombinantepitope-based vaccine)及表位DNA疫苗(epitope DNA vaccine，minigenes/epigenes)，是目前研制感染性疾病和恶性肿瘤疫苗的方向。表位(epitope)是抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，又称抗原决定簇(antigenic determinant)，它是T细胞抗原受体(T cell receptor，TCR)和B细胞抗原受体(B cell receptor，BCR)及抗体特异结合的基本单位。在免疫应答中，TCR和BCR所识别的抗原表位不同，分别称为T细胞表位和B细胞表位。主要组织相容性复合体(major histocompatibilitycomplex，MHC)是高度多态性的细胞表面分子，它将多肽片段递呈给T细胞。与MHC I类分子结合的抗原肽为8-12个氨基酸，是来自内源性抗原经蛋白酶降解后的产物。蛋白酶水解片段通过抗原加工相关转运体(transporterassociated with antigen processing，TAP)转运至内质网与新合成的MHCI类分子相结合，MHC肽复合体转移至细胞表面被CD8⁺细胞毒T淋巴细胞的TCR识别。MHCII类分子结合肽长度变化较大，为9-25个氨基酸，主要由外源蛋白通过溶酶体中的蛋白酶降解而来。在内体溶酶体中与MHC II类分子结合后，MHC肽复合体也转运至细胞表面被CIM T细胞TCR识别。据此可设计出两大类T细胞疫苗，即与相应的MHC I及MHC II类分子相关的CD8 T细胞疫苗和CIM T细胞疫苗。CIM辅助性T细胞(helper T cell，Th)又分为分泌不同细胞因子却又交叉调节的两群，即Th1和Th2。