[发明专利]检测前庭导水管扩大相关基因SLC26A4的281C＞T突变的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测是否存在SLC26A4基因外显子3的281C＞T杂合突变的试剂盒，所述试剂盒包括用于扩增样本DNA中SLC26A4基因第281位碱基的PCR引物；以及下述一种或几种试剂的组合：

从待测样品中提取DNA的试剂；

相应的PCR反应试剂；

对PCR扩增产物进行测序的试剂；和/或

对PCR扩增产物进行限制性内切酶酶切反应的试剂。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其中所述的PCR引物为：

PDS3-F：5’-GGCAAAAGCATGGTAAGCAC-3’

PDS3-R：5’-AGGGTAAGCAACCATCTGTCA-3’。

3.如权利要求1所述试剂盒，所述试剂盒用于检测位于SLC26A4基因外显子3的281C＞T杂合突变的步骤包括：

1)采集待测个体的血液、体液或组织样本，提取DNA；

2)以该DNA为模板，以下列PCR引物进行PCR反应，得到PCR反应产物；

PDS3-F：5’-GGCAAAAGCATGGTAAGCAC-3’

PDS3-R：5’-AGGGTAAGCAACCATCTGTCA-3’

3)将得到的PCR反应产物进行直接测序，并将测序结果与SLC26A4正常基因的序列进行比较，确定是否存在SLC26A4基因的281C＞T突变位点；或

4)将得到的PCR反应产物采用限制性内切酶进行酶切反应，琼脂糖电泳检测，确定是否存在SLC26A4基因的281C＞T突变位点。

4、如权利要求3所述试剂盒，所述步骤还进一步包括：

5)按照正常阅读框架进行翻译以确定是否存在T94I氨基酸突变位点。