[发明专利]蜂王胶分解酶含有物

说明书

技术领域

本发明涉及由西方蜜蜂(Apis mellifera)的2～3日龄蜂王幼虫制备的蜂王胶分解酶含有物、上述蜂王胶分解酶含有物中所含有的蜂王胶分解酶、以使用上述蜂王胶分解酶含有物或上述蜂王胶分解酶进行制备为特征的蜂王胶分解物、以及使用上述蜂王胶分解酶含有物或上述蜂王胶分解酶的蜂王胶的分解方法。

背景技术

蜂王胶是为了使蜂王幼虫生长，工蜂从咽下腺和上颚(mandible)腺分泌的乳白色胶状的营养物质。由于蜂王与工蜂在遗传上是同质的，因此认为蜂王胶中包含某些诱导向蜂王分化的控制因子，但上述物质尚未明确。上述控制因子以及向蜂王分化的诱导机理的阐明对于提高蜂王的人工生产效率等是有用的，因此正由世界上的研究者进行研究。

蜂王胶根据蜂群、品种、蜜蜂采花蜜或花粉等的花的种类等而变化，但是通常鲜重的约2/3为水分，且以蛋白质、糖类和脂肪酸为主要成分。此外，也含有大量的维生素或矿物质等，营养价值非常优异。此外，虽然未在科学上得到证实，但是一直认为具有疲劳恢复作用、抗过敏作用、抗癌作用、免疫增强作用等大量的药理作用。因此，广泛用于营养辅助食品或药品原料。

近年，约占蜂王胶干燥重量的40％的蛋白质作为蜂王胶的主要生理活性物质而备受瞩目。特别是，大量报告了利用蜂王胶蛋白质分解物的生理活性的发明。例如，报告了(1)涉及感染防御机能增强剂的发明，其特征在于，含有作为有效成分的、通过蛋白酶分解蜂王胶中的蛋白质而得到的分子量为3000以下的肽(例如，参照专利文献1。)。上述发明是基于下述知识而提出的发明：即，通过蛋白酶产生的蜂王胶蛋白质分解物，与未分解的蜂王胶蛋白质相比，感染防御机能优异，而且粘度低且为水溶性，稳定性优异，所以容易添加到食品中以及口服摄取。此外，还报告了(2)涉及用胰蛋白酶处理蜂王胶原料而得到的具有血管紧张素转换酶抑制作用的蛋白分解物的发明(例如，参照专利文献2。)。

此外，作为涉及用作食品的蜂王胶分解物的发明，还报告了(3)低过敏原蜂王胶，该低过敏原蜂王胶为降低了过敏性的低过敏原蜂王胶，其特征在于，含有10-羟基癸烯酸和来自蜂王胶的肽性成分，所述肽性成分由分子量4.5kDa以下的成分构成(例如，参照专利文献3。)。上述发明是基于下述知识而提出的发明：即，通过蛋白质分解酶处理和使用β-甘露糖苷酶的糖分解酶处理，在来自蜂王胶的肽性成分中分解除去易引起过敏的分子量超过4.5kDa的成分，从而容易降低过敏性。

如此，对于蜂王胶分解物、特别是对蜂王胶蛋白质分解物所具有的各种各样的生理活性有很多报告，但是阐明具体的生理活性物质、以至其具体的作用机理的报告非常少。生理活性物质的特定和作用机理的阐明有助于蜜蜂的分化机理的阐明、对人等动物更有效的药品或机能性食品等的开发，所以强烈期望对蜂王胶分解物进行进一步的研究、研究。而且，为了有效地进行蜂王胶分解物的研究等，重要的是得到含有丰富的机能性肽等生理活性高的分解物的蜂王胶分解物。

专利文献1：日本特开平8-59499号公报

专利文献2：日本特开2005-255670号公报

专利文献3：日本特开2005-287411号公报

但是，以上述(1)方法为代表的现在使用的方法大多只是使用通用的蛋白酶等来适当地分解蜂王胶蛋白质而已。上述通用蛋白酶等由于不以蜂王胶作为本来的基质，因此在不适当的部位分解，有可能使本来有用的肽的机能失去活性。通过使用以蜂王胶作为基质的蛋白酶等，可以解决上述问题，但是尚未发现这种酶。

发明内容

本发明的目的在于，提供最佳的蜂王胶分解酶以及上述蜂王胶分解酶含有物，用于从蜂王胶中有效地得到机能性肽等生理活性高的分解物。

此外，本发明的目的在于，提供以使用上述蜂王胶分解酶含有物等进行制备为特征的蜂王胶分解物、以及使用上述蜂王胶分解酶含有物等的蜂王胶的分解方法。

本发明人为了解决上述课题进行了深入研究，结果认为，以蜂王胶为主食、且通过摄食蜂王胶来控制向蜂王分化的蜂王幼虫先天具有最适于分解蜂王胶的分解酶，从而，通过从蜂王幼虫的幼虫体液提取物中分离含有具有蜂王胶蛋白质的分解活性的酶的馏分来完成本发明。

即，本发明提供蜂王胶分解酶含有物，通过包括下述工序的方法由西方蜜蜂(Apis mellifera)的2～3日龄蜂王幼虫制备：

(a)在6℃以下对上述蜂王幼虫的体组织悬浮物进行离心处理，从而分离为三层，即固体上层、溶液中层、沉淀下层的工序；

(b)回收上述中层作为蜂王胶分解酶含有物的工序。