[发明专利]免疫球蛋白单个变体抗原结合区及其特异性构建体

权利要求书

1.一种双特异性配体，其包含具有对第一表位或抗原的结合特异性的第一免疫球蛋白单个可变区和互补的具有对第二表位或抗原的结合活性的第二免疫球蛋白单个可变区，其中所述抗原或表位之一或两者发挥延长配体体内半衰期的作用，且其中所述第一和第二可变区缺乏具有相同特异性的共同互补区，条件是所述双特异性配体不是由抗-HSA V_H区和抗-β半乳糖苷酶Vκ区组成的。

2.权利要求1的双特异性配体，其至少包含一个单个的抗体重链可变区和一个互补的单个的抗体轻链可变区，致使这两个区域能结合而形成互补的V_H/V_L对。

3.权利要求2的双特异性配体，其中的V_H和V_L由抗体scFv片段提供。

4.权利要求2的双特异性配体，其中的V_H和V_L由抗体Fab区提供。

5.一种四链IgG免疫球蛋白配体，其包含权利要求2中的双特异性配体。

6.权利要求5的四链IgG免疫球蛋白配体，其中所述IgG包含两个双特异性配体，所述双特异性配体在它们的可变区是相同的。

7.权利要求5的四链IgG免疫球蛋白配体，其中所述IgG包含两个双特异性配体，所述双特异性配体在它们的可变区是不同的。

8.前述任一项权利要求的配体，其中的第一和第二表位独立结合，致使双特异性配体可以同时结合第一和第二表位或抗原。

9.权利要求8中的配体，其中的双特异性配体包含在溶液中均衡存在的第一种形式和第二种形式，其中的两种表位或抗原都独立地结合第一种形式，但竞争与第二种形式的结合。

10.前述任一项权利要求的配体，其中的可变区源自针对所述表位或抗原的免疫球蛋白。

11.前述任一项权利要求的配体，其中所述第一和第二表位存在于不同的抗原上。

12.权利要求1-8中的任何一项权利要求的配体，其中所述第一和第二表位存在于相同的抗原上。

13.前述任一项权利要求的配体，其包含源自单个抗体功能域库的可变区。

14.权利要求13中的配体，其中所述库展示于丝状噬菌体表面，并且其中的单个抗体功能域是通过噬菌体库与抗原的结合而选出的。

15.前述任一项权利要求的配体，其中至少一个可变区的序列经突变或DNA改组修饰过。

16.前述任一项权利要求的双特异性配体，其中所述可变区是非共价结合的。

17.权利要求1-15中的任何一项权利要求的双特异性配体，其中的可变区是共价结合的。

18.权利要求17中的双特异性配体，其中的共价结合是通过二硫键介导的。

19.权利要求1-18中的任何一项权利要求的配体，其包含TNFα特异性的dAb单体配体，其以50nM至20pM的解离常数(Kd)和5×10^-1至1×10^-7S^-1的K_off速率常数与人TNFα解离，这是通过表面等离子体共振测定得出的。

20.权利要求19中的配体，其中的dAb是Vκ。

21.TNF受体1(p55)特异性的dAb单体配体，其以50nM至20pM的解离常数(K_d)和5×10^-1至1×10^-7S^-1的K_off速率常数与人TNF受体1解离，这是通过表面等离子体共振测定得出的。

22.权利要求19-21中的配体，其中的单体在标准细胞测定法中以500nM至50pM的ND50中和人TNFα或TNF受体1。