[发明专利]具有抗炎免疫作用的轮叶党参总皂苷及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，涉及轮叶党参总皂苷及其制备方法，还涉 及轮叶党参总皂苷治疗炎症免疫性疾病的医药用途。

背景技术

炎症免疫性疾病，如类风湿性关节炎、慢性支气管炎、系统性红斑狼 疮等，为临床上常见的慢性病，以反复发作的慢性过程为特征，其发病原 因不仅是病原体直接感染的结果，还涉及到机体免疫功能紊乱等多种机制。 目前，对类风湿性关节炎的治疗主要着眼于抗炎、镇痛；对慢性支气管炎 的治疗主要着眼于抗炎、抗菌、镇咳、平喘作用的研究，至今尚无令人十 分满意的药物。炎症免疫性疾病发病的一个最重要原因为机体的免疫功能 紊乱，患者反复应用广谱抗生素、激素等药物，造成菌群失调及抗药性， 使机体免疫功能更加低下。

基于中医药治疗慢性病的丰富临床实践及其调整人体动态平衡的用药 特点，国内外学者对单味中药和复方进行了广泛研究。例如，发现了雷公 藤多苷，白芍总苷，商陆皂苷A，黄芪皂苷、枇杷叶总三萜酸的抗炎和免 疫调节作用。中药活性成分具有独特作用机制，能够调节患者的免疫功能， 减缓或阻止其病程发展，使其成为非常有前途的炎症免疫性疾病的治疗药 物。

轮叶党参(Codonopsis lanceolata，别名：山海螺、羊乳、四叶参) 是桔梗科多年生缠绕性草本植物，具有补虚润肺、通乳排脓、解毒消肿、 强身壮力等功效，在东北地区资源丰富，而且作为无毒副作用、无污染、 风味较佳的天然山野菜，出口韩国和日本。中国专利申请号02109559.0 和200510136742.8分别公开了名称为“降血脂保健饮料及其制备方法”和 “轮叶党参保健饮料”的发明专利，但未见其它方面的专利申请。近来， 我们在前期对清肺汤(治疗老年慢性支气管炎经验方，轮叶党参为处方的 主药)的抗炎免疫作用的研究基础上，发现轮叶党参醇提物显示较强活性。 对上述醇提物进行提取分离，并选用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型对几个 部位及给药剂量进行正交设计，筛选出抗炎活性部位为轮叶党参总皂苷 (CLS)。进一步对CLS进行系统的化学研究，分离得到了多个三萜皂苷化 合物，其中，codonolaside，codonolaside I，codonolaside II， codonolaside III，codonolaside IV等5个三萜皂苷化合物为发明人所 阐明的的新化合物(Pharmazie，2007，62(6)：463-467；Chin.Chem. Lett.，2006，17(12)：1460-1463)。经初步的动物实验，发现这些三萜 皂苷化合物显示了很强的抗炎和免疫调节作用。上述化学和药理研究为其 临床应用提供了科学依据。目前，尚未见有关轮叶党参总皂苷在治疗炎症 免疫性疾病药物中应用的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供中药轮叶党参中含有三萜皂苷类活性成分的提 取物的制备方法，并明确提出了其治疗类风湿性关节炎、慢性支气管炎、 系统性红斑狼疮等炎症免疫性疾病的医药用途，而且提供了一种科学稳定 的，适用于工业化生产的制备轮叶党参总皂苷的方法。

轮叶党参总皂苷的制备方法是轮叶党参粉碎后，经70％乙醇回流提取， 大孔吸附树脂吸附，用水洗去杂质，用醇液洗脱，洗脱液经正丁醇萃取而 得到。其特征包括如下3步骤：

A、70％乙醇提取：轮叶党参粗粉，加6-9倍量的70％乙醇浸泡，加热回 流提取，每次1-3小时，提取2-4次，合并各次提取液，减压回收溶剂至 溶液所含生药的浓度为30-40g/ml。

B、大孔树脂吸附：A步水提浓缩液经大孔吸附树脂吸附，用稀醇(0-20％) 洗去杂质，再用70-75％醇液洗脱，收集醇洗脱液，减压回收溶剂，得到总 皂苷粗品。

C、除杂与脱色：B步所得总皂苷粗品，混悬于水溶液中，经正丁醇萃 取，减压回收溶剂，得到该总皂苷。

进一步，该提取物经反复的Sephadex LH-20柱色谱及反相ODS柱色谱， 水-甲醇混合溶剂梯度洗脱，得到多个三萜皂苷类化合物，经理化方法和核 磁共振谱学分析，确定了它们的结构，结构通式为：