[发明专利]抱茎苦荬菜黄酮提取物及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及抱茎苦荬菜中木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷新的制备方法及其应用，公开了木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷含量25％-99.5％的抱茎苦荬菜提取物的制备方法，公开了木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷对照品新的制备方法及其在抱茎苦荬菜及含有其提取物的药物制剂中质量控制中的应用，还公开了该提取物在制备治疗冠心病、脑梗塞和骨折药物中的应用。

背景技术

抱茎苦荬菜为菊科植物苦荬菜属抱茎苦荬菜的二年生花期干燥全草，又名苦碟子。味苦、辛、性寒。功能：止痛消肿、清热解毒，主治：头痛、牙痛、胃痛、手术后疼痛，跌打伤痛、阑尾炎、肺脓肿、咽喉疼痛、痈肿疮疗等。对苦碟子药材的研究近几年有了很大的发展，据文献报道抱茎苦荬菜含有黄酮、腺苷、内酯等化学成分。药理研究表明黄酮类成分是其中的主要活性成分类别之一，化学研究表明抱茎苦荬菜黄酮类成分以木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、木犀草素7-O-β-D葡萄糖苷、芹菜素7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、芹菜素7-O-β-D葡萄糖苷以及其它数种黄酮类成分含量较高。不同的提取方法得到的提取物由于包含不同的黄酮类化合物、不同的含量，其药理、药性存在很大差异。因此在保证药效的前提下，尽可能提高提取物黄酮的纯度和明确提取物中主要黄酮类成分是技术难点。

目前研究苦碟子有效成分的提取方法可归纳为以下几种：

1、先用水或醇提取，将回收溶剂后的提取物混悬于水中，分别用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇提取，划分成几个提取部分。再用硅胶柱或高效液相半制备柱层析、分离成单组分物质。上述方法是试验室研究单一黄酮成分的常用分析方法，不适合医药工业化生产抱茎苦荬菜黄酮提取物。

2、申请号200510082836.1的发明专利“木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷及其提取方法和用途”，公开了从抱茎苦荬菜药材中提取分离木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷的一种方法，先后采用钙-硫法得到粗黄酮提取物，再经过硅胶柱层析法和HPLC分离制备，得黄色无定型粉末。该制备方法仅仅适合实验室分析型工艺，获得的产品数量为毫微克级，且操作复杂，产品收率低，成本大，不适合工业化生产。除此之外，木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷不属于新化合物，在2001年6月，沈阳药科大学博士论文《抱茎苦荬菜的化学成分和生物活性研究》报道了该化合物的提取分离和结构测定，且明确指出Young HS等在1992年之前就从抱茎苦荬菜中分离和测定了木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷，属于已知化合物。同时，该专利公开了木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷的液相测定条件，存在以下不足：用水制备对照品溶液，溶解度低，溶解缓慢，且易染菌和变质；流动相采用乙腈，成本高，毒性大；对柱温的要求高，需要40℃，不利于常规液相仪操作。

3、申请号200610072744.X的发明专利申请“苦碟子黄酮及其制备方法和含它的冻干粉针与质量控制方法”。公开了苦碟子提取物的制备方法，采用反复醇液调酸调碱处理法，由于黄酮类化合物在碱性溶液中不稳定，易发生氧化和开环反应，且苦碟子中的大量弱酸性黄酮类化合物在酸性溶液中不易析出，致使收率低，大量活性成分流失。同时，该专利虽然提供了提取物木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量仅为8％左右，这一含量既未达到静脉注射用二类原料药的标准，即80％以上，也未达到口服用二类原料药的标准，即50％以上。

4、申请号200410078168.0的发明专利“一种含有抱茎苦荬菜提取物的制剂及其制备方法”，公开了一种含黄酮成分不少于80，其中黄酮木犀草素7-O-葡萄糖醛酸不少于24，腺苷不少于0.18的抱茎苦荬菜提取物及制剂，采用的是提取液加絮凝剂或直接进行柱层析，一方面絮凝工艺操作复杂，产品收率低，且易带入非药物性杂质，另一方面，简单的水或醇处理的提取液进行柱层析，杂质含量多，影响分离效果，致使生产负荷大，而且成品含量低。

本发明的抱茎苦荬菜提取物具有区别于上述专利涉及到提取物或制剂的显著特点是，指标性和活性成分木犀草素-7-O-β-D吡喃葡萄糖醛酸苷含量高达25％-99.5％，制备方法采用了稀醇提取法，膜组件超滤法，pH梯度提取法、高温除杂质法、酸醇结晶法和低温冷藏重结晶法，从而得到本专利申请的抱茎苦荬菜提取物，制备工艺适合药品工业化生产所需条件。且该提取物有效剂量小，药理活性强，毒性小，经药理实验证明具有很强的治疗冠心病，心绞痛、脑梗塞和骨折疾病的作用，可制成各种固体和液体药物制剂。

发明内容