[发明专利]一种重组风疹病毒E1蛋白及其应用

权利要求书

1.一种编码风疹病毒E1蛋白的重组DNA，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种重组风疹病毒E1蛋白，其特征在于：它由权利要求1所述的重组DNA序列编码，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.一种重组风疹病毒E1蛋白的表达载体，其特征在于：它是将如SEQ IDNO：1所示的重组DNA序列按照如图1所示的构建方式插入到质粒pET-32a上得到的重组质粒pET-32a-E1。

4.一种表达重组风疹病毒E1蛋白的工程菌株，其特征在于：它含有权利要求3所述的表达载体pET-32a-E1，宿主菌为大肠杆菌(Escherichia coli)。

5.一种检测风疹病毒IgM抗体感染的试剂盒，其特征在于：该试剂盒中含有SEQ ID NO：2所示的重组风疹病毒E1蛋白。

6.按照权利要求5所述的检测风疹病毒IgM抗体感染的试剂盒，其特征在于：该试剂盒组成如下：

1)反应板：用抗人IgM抗体包被液包被空白板，40ng/100μl/孔，4℃静置16～24小时，洗涤扣干后，加入封闭液，200μl/孔，37℃静置2小时，弃液、干燥后封装；

2)酶结合物：将重组风疹病毒E1蛋白与酶标抗原稀释液混合均匀；

3)浓缩洗液：pH7.4，0.2M PBS，2％吐温-20；

4)底物液A：pH4.5，0.1M柠檬酸-醋酸盐缓冲液，0.05％过氧化氢；

5)底物液B：50％甲醇，0.05％3，3，5，5-四甲基联苯胺；

6)终止液：1M硫酸。

7.根据权利要求6所述的检测风疹病毒IgM抗体感染的试剂盒，其特征在于：包被抗人IgM抗体的浓度是40ng/孔；酶结合物中，重组风疹病毒E1蛋白的浓度为4mg/mL。 

8.按照权利要求6或7所述的检测风疹病毒IgM抗体感染的试剂盒，其特征在于：所述的包被液是0.05mol/l、pH9.6的碳酸盐缓冲系统；所述的封闭液由0.01mol/L PBS、0.2％酪蛋白和0.1％硫柳汞钠组成，pH＝8.0；所述的酶标抗原稀释液由0.01mol/L PBS、0.5％酪蛋白和0.1％硫柳汞钠组成，pH＝7.2。

9.权利要求2所述的重组风疹病毒E1蛋白在制备单抗、多抗及蛋白芯片中的应用。