[发明专利]人工创制植物雄性不育的方法

权利要求书

1、一种人工创制植物雄性不育的方法，其特征在于，它是将由花药特异性表达的Osg6B启动子驱动的HSP70基因的反义RNA表达载体转入到禾本科植物中，抑制花药内源HSP70基因的表达，进而干扰转基因植株花药的正常发育，获得雄性不育转基因植株的方法。

2、根据权利要求1所述的人工创制植物雄性不育方法，包括表达载体的构建、禾本科植物的遗传转化和转基因植株花粉育性的检测，其特征在于，所述表达载体的构建包括：

(1)植物花药特异性启动子Osg6B的克隆——根据SEQ ID NO：1所示的序列设计具有SEQ ID NO：2所示序列的上游引物和具有SEQ ID NO：3所示序列的下游引物，以日本晴基因组DNA为模板PCR扩增，得到具有SEQ ID NO：4所示序列的目标片段；

(2)HSP70反义片段的选择——选择靶位点位于HSP70基因5’翻译起始密码子区，HSP70反义片段具有SEQ ID NO：5所示的序列；

(3)载体构建——根据HSP70反义片段合成具有SEQ ID NO：6所示序列的反义链和具有SEQ ID NO：7所示序列的正义链，构建成能够表达HSP70反义片段的表达载体。

3、根据权利要求1或2所述的人工创制植物雄性不育方法，其特征在于，所述禾本科植物为小麦。