[发明专利]痕量真菌毒素分子印迹柱制备方法及应用

权利要求书

1.一种痕量真菌毒素分子印迹柱制备方法，其特征是包括以下步骤：

(1)选择能与真菌毒素合成分子印迹聚合物的功能单体；

(2)按一定摩尔比将真菌毒素模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂混合均匀制成分子印迹聚合物溶液；

(3)利用纳米材料，按照现有方法制备出纳米溶液，所述纳米溶液为碳纳米管溶液、纳米金溶液或纳米铂溶液；

(4)利用表面修饰技术，将纳米材料和分子印迹聚合物修饰到玻璃管柱内表面上，所述纳米材料和分子印迹聚合物修饰到玻璃管柱内表面包括以下步骤：

a、选用长度为5-10cm，直径为2-10mm的玻璃管柱，分别用1mol/L HNO3和1mol/L NaOH清洗，然后用双蒸水彻底清洗数次，吹干；

b、将制备的纳米溶液超声处理20-60min，得到分散的纳米溶液；

c、将分散的纳米溶液注入玻璃管柱内，填满，将玻璃管柱两端封闭，浸泡5-10min，排出管内的纳米溶液，将玻璃管柱在室温下晾干；

d、将步骤c中晾干的玻璃管柱中再注入分子印迹聚合物溶液，填满，将玻璃管柱两端封闭，浸泡5-10min，然后将玻璃管柱中的分子印迹聚合物溶液排出，用洗脱剂洗脱20-30min，在室温下干燥5-10min；

e、重复步骤c和步骤d过程4-7次，制得所述分子印迹柱。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征是：所述真菌毒素模板分子、功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和有机溶剂的摩尔比为0.1～1∶1∶0.3～6∶25～65∶0.01～0.15∶1.0～25。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征是还包括以下步骤：将分子印迹柱浸入pH6.8-7.2缓冲液中，保存在4℃冰箱中，24h后使用。

4.根据权利要求1所述制备方法，其特征是：所述洗脱剂为乙腈、水、甲醇和乙酸混合液或乙腈和乙酸混合液。

5.根据权利要求3所述制备方法，其特征是：所述缓冲液为柠檬酸-磷酸。

6.根据权利要求1或2所述制备方法，其特征是：所述功能单体为丙烯酸、甲基丙烯酸或4-乙烯基吡啶；所述交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、N，N-亚甲基二丙烯酰胺、3，5-二(丙烯酰胺)苯甲酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二乙烯基苯或季戊四醇三丙烯酸酯；所述引发剂为偶氮二异丁腈；所述致孔剂采用二氯甲烷、氯仿、乙腈、甲醇、异丙醇、四氯化碳、N，N-二甲基酰胺或二甲基亚砜；所述有机溶剂为二氯甲烷或四氯化碳。

7.一种检测痕量真菌毒素的方法，其特征是包括如下步骤：将按上述任意一种方法制得的分子印迹柱连接到化学发光分析仪，将化学发光体系溶液与样品溶液分别泵入化学发光分析仪，对样品中的真菌毒素进行检测。

8.根据权利要求7所述检测痕量真菌毒素的方法，其特征是：所述化学发光体系溶液为鲁米诺溶液，光泽精溶液，N-溴代丁二酰亚胺溶液，Ce(IV)-SO₃^2-溶液，鲁米诺-KMnO4溶液，鲁米诺-H₂O₂溶液，异烟肼-NaClO溶液，NaIO₄-H₂O₂溶液。