[发明专利]一种牛血清采集方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种动物血清采集方法，更具体地说涉及一种牛血清采集方法。

背景技术

细胞培养在整个生物技术产业的发展中起着核心作用，细胞培养的发展，培养基的质量又是关键，而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要的甚至是难以替代的作用。在动物血清的应用中新生牛血清又是最为广泛的，是医药生物技术产品中重要的原材料之一。国内新生牛血清一年的市场需求量在50万升以上。我国的内蒙、黑龙江、河北、河南、甘肃、宁夏、新疆等省区作为我国的乳肉基地，饲养了大量的奶牛，由于考虑到养牛的经济效益，每年淘汰大量的新生小公牛。这些小公牛被屠宰时，血液可通过无菌采集、离心分离出血清，用于生产疫苗、诊断试剂等生物制品。血浆用于制造高蛋白的血粉饮料。小牛血液综合利用项目实施以来，当地的牛价有了明显的提高，从而极大地促进了农牧民的增收，促进了当地养牛业发展，对地方经济的发展产生了巨大的推动作用，对促进当地的经济和社会发展具有重要的现实意义。以往小牛血直接被排放到下水道中，不仅减少了农牧民收入，也对环境造成了一定的污染。目前，国内采集牛血清的办法是：划开小牛颈部皮肤，挑出颈动脉消毒后，用灭过菌的手术剪剪开一小口，将无菌采血管插入其中，血液由采血管流到离心瓶中，再将离心瓶放到离心机，以3600～4000转的转速离心30分钟左右，停机后取出离心瓶，将分离的血清用无菌采血管虹吸到包装容器中。这种采集血清方法的缺点是：不稳定纤维蛋白不易析出，带到血清成品中再析出，使成品出现絮状沉淀，影响到成品的外观和质量，从而使用户误认为污染而不敢使用，给企业造成一定的损失。析出的纤维蛋白很容易粘贴在瓶壁上，并将血清包在其中，不利于血清的离心分离，无法虹吸到包装容器中，影响血清的采集数量。此时，须用刀片划开纤维蛋白后，进行第二次离心才能将血清分离，在刀片划开时很容易将下面的血浆翻起，红细胞易破裂而造成溶血，使血清外观偏红，直接影响到血清成品的外观。另外接血的离心瓶不是等渗环境，由于渗透压的改变，容易造成红细胞破裂而溶血。

发明内容

本发明的目的是通过对传统的采集血清生产工艺进行改造，提供一种血清采集方法，提高血清的采集量，提高血清的品质。

本发明公开了一种牛血清采集方法，有下述顺序的步骤：首先采血：将小牛保定后，用碘伏和75％酒精棉球檫拭颈部皮肤消毒，用消毒的手术刀划开小牛颈部皮肤，并用消毒的止血钳挑出颈动脉血管，同时用二个止血钳夹住颈动脉血管两端，用酒精棉球檫拭血管，再用已消毒的手术剪在二个止血钳中间剪开血管一小口，将一次性采血管插入，采血管的另一端伸入接血瓶中，紧贴瓶壁。然后接血：将0.9％氯化钠注射液按接血瓶总容积1％的比例加入到已灭过菌的接血瓶内，盖上瓶盖后将离心瓶倾斜45°慢慢摇转，确保注射液浸润离心瓶的所有内壁。再取下靠近心端的止血钳，血液经采血管流到接血瓶。接血瓶接满后盖上瓶盖，按先后顺序放到38℃水浴箱中，每10分钟观察一次，半小时后每5分钟观察一次，直到血清开始析出时取出。再离心：将接血瓶从水浴箱中取出后放入离心机中，以4000转/分的速度离心25～30分钟。最后分装：离心机停机后将接血瓶取出，用无菌采血管将接血瓶中的血清虹吸到包装容器中，装满密封后立即冷冻。

本发明的优点是：在接血瓶内加入0.9％氯化钠注射液，人为制造了一个等渗环境，血液的渗透压不会发生改变，不会因红细胞破裂而溶血。接血瓶在38℃水浴箱内，使血液均匀受热，这样有利于不稳定蛋白的析出，有利于血清的析出、离心和分离，采集的血清外观为黄色且透亮。本发明采集的血清不仅血清品质好，而且采集数量比传统方法要多出300毫升以上。按45公斤小牛计算，传统的方法最多能采集1200毫升血清，而本发明采集的血清为1500～1800毫升，每头牛血清多收益30～60圆，可以促进农牧民的增收。

具体实施方式

本发明的关键是：在接血瓶内按接血瓶总容积1％的比例加入0.9％氯化钠注射液，在离心前将接血瓶放到38℃水浴箱中，直到血清开始析出后才可进行离心。首先采血：将小牛保定后，用碘伏和75％酒精棉球檫拭颈部皮肤消毒，用消毒的手术刀划开小牛颈部皮肤，并用消毒的止血钳挑出颈动脉血管，同时用二个止血钳夹住颈动脉血管两端，用酒精棉球檫拭血管，再用已消毒的手术剪在二个止血钳中间剪开血管一小口，将一次性采血管插入，采血管的另一端伸入接血瓶中，紧贴瓶壁。然后接血：将已灭过菌的1000毫升容积的接血瓶内加入10毫升0.9％氯化钠注射液，盖上瓶盖后将接血瓶倾斜45°慢慢摇转，确保0.9％氯化钠注射液浸润接血瓶的所有内壁。再取下靠近心端的止血钳，血液经采血管流到接血瓶。接血瓶接满后盖上瓶盖，按先后顺序放到38℃水浴箱中，每10分钟观察一次，半小时后每5分钟观察一次，直到血清开始析出时取出。再离心：将接血瓶从水浴箱中取出后放入离心机中，以4000转/分的速度离心25～30分钟。最后分装：离心机停机后将接血瓶取出，用无菌采血管将接血瓶中的血清虹吸到包装容器中，装满密封后立即冷冻。